Anticorpo policlonale anti-MBNL1 di coniglio per WB - Q9NR56

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MBNL1

• MBNL1 (Proteina Muscleblind-like 1, nota anche come proteina legante l'RNA con espansione a triplette) è una proteina legante l'RNA che media la regolazione dello splicing alternativo del pre-mRNA.
• Agisce come attivatore o repressore dello splicing su specifici bersagli pre-mRNA; ad esempio, inibisce l'inclusione dell'esone della troponina cardiaca T (TNNT2) ma induce l'inclusione dell'esone del recettore dell'insulina (IR) nel muscolo, e antagonizza l'attività di splicing delle proteine CELF.
• MBNL1 si lega alla sequenza consenso 5'-YGCU(U/G)Y-3' e a strutture a stem-loop all'interno degli RNA bersaglio, inclusi l'RNA con ripetizioni CUG espanse associate alla distrofia miotonica.
• Insieme alle proteine leganti l'RNA RBPMS e RBFOX2, MBNL1 attiva eventi di splicing alternativo nelle cellule muscolari lisce vascolari (PubMed:37548402).
  Riferimenti correlati: PMID:37548402
• A livello subcellulare, MBNL1 si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nei granuli citoplasmatici.
• È altamente espresso nel muscolo cardiaco e scheletrico, nonché durante la differenziazione dei mioblasti, con una espressione a livello proteico inferiore in altri tessuti tra cui cuore, cervello, placenta, polmone, fegato, rene e pancreas.
• MBNL1 è una fosfoproteina a dito di zinco; le modifiche post-traduzionali, inclusa la fosforilazione, possono regolare la sua attività e localizzazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1-382 di MBNL1 umano, una regione che comprende i domini di legame dell'RNA a dito di zinco di tipo CCCH; questo design probabilmente mira ad epitopi funzionali conservati importanti per il legame all'RNA.
• Per il Western blot (WB), testare una gamma di diluizioni dell'anticorpo su lisati di tessuti muscolari (es. muscolo cardiaco o scheletrico) dove MBNL1 è arricchito; la banda prevista è intorno a 42 kDa, ma validare la migrazione effettiva nel proprio sistema.
• L'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC) potrebbero richiedere l'ottimizzazione del recupero dell'antigene e della permeabilizzazione; utilizzare tessuti di controllo positivi e negativi per confermare la specificità.
• Per l'ELISA, valutare il legame alla proteina o al peptide MBNL1 ricombinante e ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento per il proprio saggio.
• Si riporta che l'anticorpo presenta reattività crociata con topo e ratto; tuttavia, validare sempre la reattività nella specie rilevante prima di applicazioni quantitative.

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