Anticorpo monoclonale coniglio anti-MCM6 (convalidato KD) per WB, ELISA - Q14566

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del fattore di licenza per la replicazione del DNA MCM6

• Il fattore di licenza per la replicazione del DNA MCM6 (p105MCM) è un componente centrale del complesso MCM2-7, che agisce come elicasi replicativa essenziale per l'inizio e l'allungamento della replicazione del DNA "una volta per ciclo cellulare" nelle cellule eucariotiche.
• MCM6, insieme ad altre proteine MCM, forma l'elicasi CDC45-MCM-GINS (CMG), la macchina molecolare che svolge il DNA stampo durante la replicazione e costituisce la base per l'assemblaggio del replisoma (PubMed:16899510, PubMed:32453425, PubMed:34694004). Riferimenti correlati: PMID:16899510, PMID:32453425, PMID:34694004
• I siti attivi dell'ATPasi nell'anello MCM2-7 si formano alle interfacce delle subunità; un motivo conservato a dito di arginina da una subunità viene fornito in trans al sito di legame dell'ATP della subunità adiacente, e questi sei siti di ATPasi contribuiscono in modo differenziale all'attività dell'elicasi (PubMed:32453425). Riferimenti correlati: PMID:32453425
• MCM6 è localizzata prevalentemente nel nucleo durante la fase G1 e si associa alla cromatina, in linea con il suo ruolo nella licenza per la replicazione del DNA.
• La proteina subisce diverse modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua attività durante il ciclo cellulare.
• Secondo UniProt, MCM6 è classificata con parole chiave come legame ATP, ciclo cellulare, replicazione del DNA, legame al DNA, glicoproteina, elicasi, idrolasi, legame ai nucleotidi, fosfoproteina e proteoma di riferimento.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 601-821, l'anticorpo riconosce una regione C-terminale della MCM6 umana; si consiglia di convalidare la rilevazione di eventuali prodotti di clivaggio o isoforme rilevanti nel proprio sistema sperimentale.
• Per WB si raccomanda un controllo positivo come lisato cellulare di HeLa o MCF-7 (umano) o lisato di NIH/3T3 (topo); ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di bloccaggio per il campione specifico.
• L'anticorpo è stato sottoposto a validazione tramite knockout/knockdown (convalidato KD), pertanto garantisce una rilevazione affidabile della MCM6 endogena; considerare questo dato come supporto alla specificità.
• Per ELISA, valutare le prestazioni dell'anticorpo come reagente di cattura o rilevazione; abbinarlo a un anticorpo anti-MCM6 adatto o utilizzare proteina MCM6 ricombinante come standard.
• La dimensione della banda attesa è di ~93 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata (ad esempio l'8% di SDS-PAGE) e marcatori di peso molecolare per una separazione chiara.

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