Anticorpo Policlonale Anti-ME1 (WB, ELISA) - P48163

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di ME1

• L'enzima malico dipendente da NADP (ME1) è un enzima citosolico che catalizza la decarbossilazione ossidativa del (S)-malato in piruvato e CO2, utilizzando NADP+ come cofattore, e decarbossila anche l'ossalacetato.
• ME1 svolge un ruolo critico nella biosintesi dei lipidi fornendo NADPH per reazioni riduttive ed è un collegamento chiave tra la glicolisi e il ciclo dell'acido citrico.
• La proteina è espressa in modo ubiquitario nei tessuti umani, con livelli notevoli nel fegato, nella placenta e nel tessuto adiposo bianco.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono regolare l'attività enzimatica e la localizzazione subcellulare.
• Il gene ME1 subisce splicing alternativo, producendo varianti trascrizionali multiple che contribuiscono alla diversità funzionale.
• Studi strutturali (struttura 3D disponibile) rivelano un'architettura del sito attivo conservata tipica degli enzimi malici, che lega ioni metallici bivalenti e NADP+.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la regione N-terminale (aa 1-300) di ME1 umano, che è ben conservata tra uomo, topo e ratto, in linea con la reattività crociata osservata. Validare nel sistema di campioni rilevante se si utilizzano altre specie.
• Per il Western blot, lisati cellulari totali da tessuti o linee cellulari che esprimono ME1 (es. fegato, tessuto adiposo o linee cellulari tumorali) sono adatti; considerare l'uso di un controllo positivo come lisati di HepG2 o 3T3-L1. È attesa una banda vicino a 64 kDa.
• Per l'ELISA, la sensibilizzazione con proteina ME1 ricombinante o il frammento peptidico dell'immunogeno può essere ottimizzata; eseguire esperimenti di titolazione per determinare la diluizione ottimale dell'anticorpo e la concentrazione di sensibilizzazione.
• Essendo un anticorpo policlonale, la variazione da lotto a lotto può influire sulle prestazioni; si consiglia di rivalidare le applicazioni critiche con ogni nuovo lotto.

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