Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-MEK1 per WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q02750

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MEK1

• MEK1 (MAP2K1) è una chinasi a doppia specificità che fosforila residui di treonina e tirosina nell'anello di attivazione di ERK1/2 (MAPK3/1), un passaggio critico nella cascata di segnalazione MAPK/ERK.
• Agisce a valle di RAS-RAF1 ed è essenziale per la trasmissione dei segnali dai recettori della superficie cellulare agli effettori intracellulari, regolando quindi processi come la proliferazione cellulare, la differenziazione e la sopravvivenza.
• MEK1 attiva BRAF attraverso un meccanismo dipendente da KSR1/KSR2, rompendo l'autoinibizione di BRAF e migliorando la propagazione del segnale. Riferimenti correlati: PMID:29433126
• La localizzazione subcellulare comprende citoplasma, centrosoma, polo del fuso mitotico, nucleo e membrana, riflettendo i suoi ruoli nella mitosi (frammentazione dell'apparato di Golgi), nel trafficking endosomiale e nell'esportazione nucleare (es. PPARG).
• È ampiamente espresso nei tessuti umani, con livelli notevolmente bassi nel cervello. Le mutazioni associate a patologie sono collegate a cardiomiopatia, displasia ectodermica e disabilità intellettiva.
• Appartiene alla famiglia delle chinasi MAP chinasi, che include anche MEK2 (MAP2K2), ed è regolato da fosforilazione e acetilazione.
• La via MAPK/ERK, guidata da MEK1, influenza la localizzazione del recettore nucleare PPARG, integrando quindi segnali metabolici e apoptotici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato è un peptide sintetico corrispondente agli amminoacidi 1–100 di MEK1 umano. La mappatura dell'epitopo suggerisce il riconoscimento della regione N-terminale, che è ben conservata; tuttavia, se la specificità è fondamentale, la reattività crociata con MEK2 deve essere esclusa sperimentalmente.
• Per Western blotting è attesa una banda intorno a 43 kDa. Convalidare utilizzando un lisato di controllo positivo da linee cellulari di uomo, topo o ratto note per esprimere MEK1 (es. HeLa, NIH/3T3, PC12).
• Per immunofluorescenza/ICC, ottimizzare le condizioni di fissazione/permeabilizzazione, poiché MEK1 può essere citosolico, associato alla membrana o nucleare a seconda dello stato cellulare.
• Per immunoprecipitazione, utilizzare un tampone di lisi delicato per preservare le interazioni proteiche. Se si desidera la co-IP di componenti della via MAPK, considerare l'uso di reticolazione.
• Nelle applicazioni ELISA l'anticorpo può essere utilizzato per la rilevazione di MEK1 ricombinante o endogeno; titolare la dose e includere controlli appropriati.

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