Anticorpo monoclonale anti-MEK1/MEK2 per WB, ELISA - Q02750/P36507

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di MEK1/MEK2

• MEK1 (MAP2K1) e MEK2 (MAP2K2) sono chinasi a doppia specificità strettamente correlate che costituiscono componenti essenziali della via di trasduzione del segnale della chinasi proteica attivata dai mitogeni (MAP).
• Nella cascata MAPK/ERK, MEK1/2 vengono attivate dalle chinasi RAF e successivamente fosforilano ERK1/2 sui residui di treonina e tirosina all'interno di un motivo Thr-Glu-Tyr, portando all'attivazione di ERK.
• È stato dimostrato che MEK1 attiva BRAF in modo dipendente da KSR1 o KSR2, rilasciando le interazioni intramolecolari inibitorie e promuovendo la dimerizzazione di BRAF. Riferimenti correlati: PMID:29433126
• La via media diverse funzioni biologiche, quali crescita cellulare, adesione, sopravvivenza e differenziamento, principalmente attraverso la regolazione della trascrizione, del metabolismo e dei riarrangiamenti del citoscheletro.
• MEK1 esporta il recettore nucleare PPARG dal nucleo, collegando la cascata alla segnalazione dei recettori nucleari.
• La cascata MAPK/ERK è inoltre coinvolta nella regolazione della dinamica endosomiale, inclusi il processamento dei lisosomi e il ciclo degli endosomi, e contribuisce alla frammentazione dell'apparato di Golgi durante la mitosi.
• MEK1 è ampiamente espressa nei tessuti umani, con livelli estremamente bassi nel cervello.
• A livello subcellulare, MEK1 si localizza nel citoplasma, nel citoscheletro, nel centrosoma, al polo del fuso, nel nucleo e nella membrana.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e acetilazione, mentre lo splicing alternativo dà origine a molteplici isoforme.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–360) di MEK1 umano, una sequenza altamente conservata in MEK2; ciò suggerisce che l'anticorpo possa riconoscere entrambe le chinasi. Validare la specificità utilizzando controlli knockout o knockdown appropriati.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno a 44 kDa. Ottimizzare le quantità di campione caricate e le diluizioni dell'anticorpo in base al tipo specifico di campione (ad esempio, lisati cellulari totali) e includere controlli positivi appropriati (ad esempio, HeLa, A431) e controlli negativi.
• È stato riportato che questo anticorpo presenta reattività crociata con topo e ratto. Confermare la reattività nel proprio sistema sperimentale quando si lavora con queste specie.
• Per le applicazioni ELISA, valutare l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione idoneo per lo sviluppo di un ELISA sandwich; potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del titolo.
• Considerato il ruolo critico di MEK1/2 nella segnalazione cellulare, il trattamento con attivatori/inibitori della via (ad esempio, fattori di crescita, U0126) può essere utilizzato per modulare l'intensità del segnale nei propri saggi.

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