Anticorpo Monoclonale Anti-MEK1/MEK2 per WB, IHC-P, ELISA - Q02750 / P36507

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MEK1/MEK2

• MEK1 (MAP2K1) e MEK2 (MAP2K2) sono protein chinasi a doppia specificità che rappresentano componenti critici della cascata di segnalazione MAPK/ERK, trasmettendo i segnali da RAS attivato a ERK.
• Catalizzano la fosforilazione dei residui di treonina e tirosina nel motivo Thr-Glu-Tyr di MAPK3/ERK1 e MAPK1/ERK2, portando alla loro attivazione e alla propagazione dei segnali a valle coinvolti nella crescita cellulare, l'adesione, la sopravvivenza e la differenziazione.
• MEK1 attiva BRAF in maniera dipendente da KSR1 o KSR2, eliminando le interazioni inibitorie intramolecolari per promuovere la dimerizzazione e l'attivazione di BRAF. Riferimenti correlati: PMID:29433126
• Subcellulare, MEK1 si trova nel citoplasma, inclusi i centrosomi e i poli del fuso mitotico, e può traslocare al nucleo e alla membrana, riflettendo il suo ruolo dinamico nella trasduzione del segnale.
• MEK1 è ampiamente espresso in tutti i tessuti, con livelli particolarmente bassi nel cervello.
• La proteina è soggetta a molteplici modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione e acetilazione, e possiede domini chinasi che legano l'ATP e i substrati nucleotidici.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico mappato sugli amminoacidi 170–270 di MEK1 e MEK2 umani, una regione che probabilmente si trova all'interno del dominio chinasi; si consiglia di verificare la specificità dell'epitopo tramite competizione peptidica o mutagenesi.
• Per il Western blot, utilizzare lisati di cellule intere da linee cellulari di uomo, topo o ratto; è prevista una banda specifica vicino a 44 kDa. Ottimizzare il bloccaggio e la diluizione dell'anticorpo per una rilevazione a basso background.
• Per IHC-P, si raccomanda il recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato, pH 6,0) e la titolazione dell'anticorpo primario su tessuti di controllo positivo noti (ad esempio, carcinoma del colon).
• Per ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; validare l'accoppiamento con opportuni standard di antigene e la reattività crociata con i paraloghi di MEK1/MEK2.
• Confermare la specificità del bersaglio utilizzando modelli di knockout o knockdown di MEK1/MEK2 nella specie corrispondente.

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