Anticorpo policlonale di coniglio anti-MEK7 (convalidato KO) per WB, IF/ICC, ELISA - O14733

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di MEK7

• MEK7 (nota anche come MKK7, JNKK2, SAPKK4) è una chinasi chinasi della proteina chinasi attivata dai mitogeni a doppia specificità, essenziale per la via di segnalazione della chinasi della proteina attivata dallo stress/c-Jun N-terminale (SAP/JNK).
• Insieme a MKK4, MEK7 attiva direttamente JNK1, JNK2 e JNK3 mediante fosforilazione, con una preferenza per il residuo Thr nel motivo di attivazione Thr-Pro-Tyr, innescando l'attività di JNK.
• La via MKK7/JNK viene attivata dalle citochine pro-infiammatorie e svolge un ruolo fondamentale nelle risposte cellulari allo stress, nell'infiammazione e nell'apoptosi.
• MEK7 partecipa alla segnalazione mitocondriale della morte cellulare, promuovendo il rilascio del citocromo c e portando alla morte cellulare programmata.
• Funziona in una via MAPK non canonica con MAP3K12 ed ERK1/2 per potenziare la trascrizione di APP mediata da AP-1 in risposta ad APOE. Riferimenti correlati: PMID:28111074
• Localizzazione subcellulare: presente sia nel nucleo sia nel citoplasma.
• È ampiamente espressa nei tessuti umani, con i livelli più elevati nel muscolo scheletrico; l'isoforma 3 è presente a bassi livelli nella placenta, nel fegato fetale e nel muscolo scheletrico.
• MEK7 è regolata mediante fosforilazione e acetilazione e appartiene alla superfamiglia delle protein chinasi, con un sito di legame per l'ATP e attività chinasica su serina/treonina/tirosina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• È stato riportato che questo anticorpo è convalidato come knockout (KO), confermandone la specificità per MEK7; utilizzare lisati di cellule o tessuti KO appropriati come controlli negativi nel Western blot.
• L'immunogeno (aa 1–250) è diretto contro la regione N-terminale della MEK7 umana, conservata tra le isoforme; nel WB è prevista la rilevazione della proteina a lunghezza intera (~47 kDa) e potenzialmente delle varianti di splicing.
• Per il Western blot, considerare un intervallo di diluizione di 1:500–1:2000, utilizzando protocolli standard di bloccaggio e rilevazione, e convalidare in linee cellulari umane, murine o di ratto che esprimono MEK7.
• Nell'IF/ICC, è necessario ottimizzare le condizioni di permeabilizzazione e fissazione; includere un controllo senza anticorpo primario per valutare il legame aspecifico.
• Le prestazioni dell'ELISA dipendono dalla purezza dell'antigene utilizzato per il rivestimento; abbinarlo a un anticorpo di cattura convalidato se si sta sviluppando un saggio sandwich.

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