Anticorpo Policlonale Anti-MELK di Coniglio per WB ed ELISA - Q14680

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MELK

• La chinasi materna embrionale a cerniera di leucina (MELK), nota anche come chinasi pEg3 o hPK38, è una serina/treonina-proteina chinasi codificata dal gene MELK nell'uomo. Appartiene a un'ampia famiglia di chinasi coinvolte nella regolazione del ciclo cellulare e nell'apoptosi.
• MELK agisce come attivatore dell'apoptosi fosforilando e attivando MAP3K5/ASK1, promuovendo così la morte cellulare programmata. Fosforila anche BCL2L14, inibendo la sua funzione pro-apoptotica, il che può influenzare la carcinogenesi mammaria.
• Come regolatore chiave del ciclo cellulare, MELK media la fosforilazione di CDC25B, promuovendone la localizzazione ai centrosomi e ai poli del fuso durante la mitosi, essenziale per una corretta divisione cellulare.
• MELK è necessaria per la proliferazione dei progenitori neurali multipotenti embrionali e postnatali, sottolineando il suo ruolo nell'auto-rinnovamento delle cellule staminali e nella neurogenesi.
• La chinasi partecipa anche alla regolazione dello splicing fosforilando ZNF622 durante la mitosi, inibendo l'assemblaggio dello spliceosoma e reindirizzando ZNF622 al nucleo.
• Studi di localizzazione subcellulare indicano che MELK è presente sulla membrana cellulare, sebbene la sua attività chinasica sia critica nei compartimenti citoplasmatici e nucleari a seconda del contesto cellulare.
• Il profilo di espressione tissutale mostra che MELK è espressa in modo prominente in placenta, rene, timo, testicolo, ovaio e intestino, con potenziali ruoli nell'ematopoiesi primitiva.
• Le modifiche post-traduzionali e le caratteristiche strutturali includono domini di legame per ATP, calcio e lipidi, e multipli siti di fosforilazione come catalogato nella voce di parola chiave Phosphoprotein.

Linee Guida Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 412–651 di MELK umana, una regione che può fornire specificità del bersaglio; verificare l'allineamento della sequenza tra le specie se la reattività crociata con topo o ratto è critica.
• Per il Western blot, ci si aspetta il rilevamento di una banda a circa 75 kDa. Considerare l'uso di intervalli di diluizione come 1:500–1:2000 con appropriati controlli positivi (es. linee cellulari con espressione nota di MELK) e validare nel proprio sistema campione.
• In ELISA, le prestazioni possono dipendere dalla conformazione della proteina bersaglio e dalle condizioni di rivestimento; considerare l'uso di proteina MELK ricombinante o lisati cellulari per determinare le diluizioni ottimali dell'anticorpo.
• Poiché è riportata reattività crociata per umano, topo e ratto, i modelli di espressione tissutale-specifici dovrebbero essere presi in considerazione quando si selezionano i controlli positivi.

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