Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-MERS-CoV Spike RBD per WB, IF/ICC, ELISA - K9N5Q8

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Glicoproteina Spike del MERS-CoV

• La glicoproteina spike (S) media l'ingresso virale legandosi al recettore ospite DPP4 (dipeptidil peptidasi 4) e facilitando la fusione di membrana (UniProt K9N5Q8).
• È una proteina di fusione virale di classe I; durante la fusione, le sue regioni a spirale avvolta formano una struttura a treccia a trimero che guida l'apposizione e la fusione delle membrane.
• La proteina viene scissa proteoliticamente nelle subunità S1 e S2; il dominio di legame al recettore (RBD) risiede all'interno di S1, mentre il peptide di fusione in S2 viene esposto dopo la scissione endosomiale.
• Codificata dal gene S, è un importante fattore di virulenza e il bersaglio primario degli anticorpi neutralizzanti (parole chiave UniProt: Virulenza, Proteina dell'inviluppo virale).
• Subcellularmente, si localizza sulla membrana del virione, sulla membrana del compartimento intermedio reticolo endoplasmatico-Golgi dell'ospite e sulla membrana cellulare dell'ospite (LOCALIZZAZIONE SUBCELLULARE UniProt).
• Le modifiche post-traduzionali includono N-glicosilazione, formazione di legami disolfuro e palmitoilazione, che sono critiche per il ripiegamento e la funzione proteica.
• La proteina spike a lunghezza intera ha un peso molecolare previsto di circa 149 kDa (Peso Mol. UniProt: 149,411 Da).

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (aa 18-725 del RBD) copre il dominio di legame al recettore cruciale per l'interazione con DPP4 dell'ospite; questo anticorpo può essere adatto per applicazioni che studiano il legame RBD-recettore.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda intorno a 149 kDa; la glicosilazione può causare lievi spostamenti di mobilità. Considerare l'uso di controlli di deglicosilazione se compaiono bande ambigue.
• Gli esperimenti di immunofluorescenza dovrebbero tenere conto della localizzazione della proteina sulle membrane intracellulari e sulla superficie cellulare; i protocolli di permeabilizzazione necessitano di ottimizzazione per il rilevamento intracellulare.
• Nelle configurazioni ELISA, la Spike RBD ricombinante (es. YP_009047204.1) può servire come controllo positivo per la titolazione dell'anticorpo e il test di specificità di legame.

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