Anticorpo policlonale coniglio anti-MERTK/MER per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q12866

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MERTK

• MERTK (noto anche come MER, RP38, c-Eyk, c-mer, Tyro12) è un recettore tirosin chinasi che appartiene alla famiglia di recettori TAM (Tyro3, Axl, Mer). Svolge ruoli critici nella sopravvivenza cellulare, nella migrazione, nella differenziazione e nella rimozione delle cellule apoptotiche attraverso l'efferocitosi. Riferimenti correlati: PMID:32640697
• Al legame del ligando (es. GAS6, LGALS3, TUB, TULP1), MERTK subisce autofosforilazione sul suo dominio intracellulare, creando siti di ancoraggio per proteine adattatrici come GRB2 e PLCG2. Questo attiva l'attivazione a valle delle cascate di segnalazione MAPK1/2, FAK e RAC1.
• MERTK è un mediatore chiave nell'epitelio pigmentario retinico (RPE), dove regola la fagocitosi dei frammenti dei segmenti esterni dei bastoncelli, essenziale per la manutenzione del ciclo visivo.
• Agisce come regolatore negativo delle risposte immunitarie innate mediate dai recettori Toll-like (TLR) attivando STAT1 e inducendo i soppressori della segnalazione delle citochine SOCS1 e SOCS3.
• La localizzazione subcellulare è principalmente alla membrana cellulare, coerente con la sua funzione di recettore transmembrana.
• MERTK è altamente espresso in testicolo, ovaio, prostata, polmone e rene, con espressione inferiore nella milza, nell'intestino tenue, nel colon e nel fegato. Non è espresso nei normali linfociti B e T, ma si trova in molte linee cellulari neoplastiche B e T, sottolineando il suo potenziale proto-oncogenico.
• La proteina è ampiamente modificata post-traduzionalmente: glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione regolano la sua attività e stabilità. Clinicamente, le mutazioni in MERTK sono legate alla retinite pigmentosa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione extracellulare (aa 26-499) di MERTK umano, che può produrre anticorpi che riconoscono sia il recettore a lunghezza intera che i potenziali domini extracellulari rilasciati. Considerare questo quando si interpretano le bande nel Western blot, che possono mostrare forme multiple intorno a 110 kDa, particolarmente in campioni con alta attività proteolitica.
• Per IHC-P, il recupero dell'antigene mediante tampone citrato mediato dal calore (pH 6.0) o tampone EDTA (pH 8.0) può essere benefico, poiché MERTK è una glicoproteina transmembrana. Validare accuratamente in tessuti di controllo positivo come testicolo o rene.
• Data la natura policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata testando su un pannello di linee cellulari positive e negative (es. cellule transettate con MERTK vs cellule con MERTK knockout). Per IF/ICC, le condizioni di permeabilizzazione devono essere ottimizzate per rilevare i pool di superficie cellulare e intracellulari.
• L'anticorpo è riportato reagire con umano, mouse e ratto; tuttavia, l'allineamento della sequenza tra l'immunogeno e le specie bersaglio dovrebbe essere confermato per le applicazioni che richiedono specificità assoluta di specie.

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