Anticorpo Monoclonale Anti-Mesotelina per WB, IHC-P, ELISA - Q13421

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Mesotelina

• La mesotelina è una glicoproteina di superficie cellulare codificata dal gene MSLN, nota anche come MPF (fattore potenziante dei megacariociti) o antigene CAK1.
• La proteina a lunghezza intera viene sintetizzata come un precursore di 71 kDa che subisce clivaggio proteolitico per produrre una forma secreta N-terminale di 31 kDa (fattore potenziante dei megacariociti, MPF) e una mesotelina legata alla membrana C-terminale di 40 kDa.
• La mesotelina ancorata alla membrana è attaccata alla superficie cellulare tramite un ancoraggio glicosilfosfatidilinositolo (GPI) ed è implicata nell'adesione cellulare.
• L'MPF è secreto ed è stato dimostrato che potenzia la formazione di colonie di megacariociti in vitro, suggerendo un ruolo nell'ematopoiesi.
• La mesotelina è espressa prevalentemente nelle cellule mesoteliali che rivestono la pleura, il pericardio e il peritoneo, ed è presente anche a livelli inferiori nel polmone, nel cuore, nella placenta e nel rene.
• È altamente sovraespressa in diversi tumori umani, inclusi i mesoteliomi, i tumori ovarici e alcuni carcinomi a cellule squamose, rendendola un bersaglio per la diagnostica e la terapia oncologica.
• La proteina subisce diverse modificazioni post-traduzionali, inclusa la glicosilazione, la formazione di ponti disolfuro e la fosforilazione, che sono critiche per la sua stabilità e funzione.
• A livello subcellulare, la mesotelina si localizza sulla membrana cellulare, nell'apparato di Golgi ed è presente anche in forme secrete.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende la regione C-terminale (amminoacidi 296–606) della mesotelina umana, che corrisponde alla forma matura legata alla membrana; pertanto, si prevede che l'anticorpo rilevi sia il precursore a lunghezza intera che la subunità legata alla membrana clivata nel Western blot.
• Per il Western blot, considerare l'uso di condizioni riducenti, poiché i ponti disolfuro possono influenzare la migrazione; il peso molecolare previsto della mesotelina di membrana matura è di circa 40 kDa, ma potrebbero essere osservate bande a pesi molecolari superiori a causa della glicosilazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), ottimizzare il recupero dell'antigene e validare in sezioni di tessuto mesoteliale o tumorale noto per sovraesprimere la mesotelina, come biopsie di mesotelioma o cancro ovarico.
• Per l'ELISA, abbinare con un anticorpo di cattura che mira a un epitopo non sovrapposto per valutare i livelli di mesotelina nel siero o nei supernatanti di coltura cellulare; notare che la forma solubile di MPF potrebbe anche essere rilevata se l'epitopo è presente nella regione N-terminale.

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