Anticorpo Monoclonale di Coniglio Anti-Mesotelina per WB, IF-P, ELISA - Q13421

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Mesotelina

• La mesotelina, codificata dal gene MSLN, è anche nota come antigene CAK1 e pre-pro-fattore potenziante i megacariociti, e subisce splicing alternativo per produrre diversi isoformi.
• La forma ancorata alla membrana della mesotelina può svolgere un ruolo nell'adesione cellulare, contribuendo alle interazioni cellula-cellula.
• Il dominio del fattore potenziante i megacariociti (MPF), rilasciato dopo il taglio, può potenziare la formazione di colonie di megacariociti in vitro.
• La mesotelina è localizzata alla membrana cellulare, ancorata tramite un'ancora GPI, e viene rilevata anche nell'apparato di Golgi; può essere secreta dopo taglio proteolitico.
• È espressa nel tessuto polmonare normale e a bassi livelli in cuore, placenta e rene; nelle cellule mesoteliali, ed è altamente espressa a livello proteico nei mesoteliomi, nei carcinomi ovarici e in alcuni carcinomi a cellule squamose.
• La proteina subisce diverse modifiche, tra cui taglio su una coppia di residui basici, N-glicosilazione, formazione di legami disolfuro e fosforilazione.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono un peptide segnale, un'ancora GPI e la presenza di molteplici domini identificati da studi di struttura 3D.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 500–600 della mesotelina umana; questa regione si trova nella parte C-terminale della proteina. Quando si utilizza questo anticorpo, considerare che potrebbe rilevare sia il precursore a lunghezza intera che la mesotelina matura o il frammento MPF, a seconda della preparazione del campione.
• Per il Western blot (WB), prevedere una banda intorno a 69 kDa (coerente con i 68 kDa previsti da UniProt) in condizioni riducenti. Convalidare il peso molecolare osservato nei vostri specifici lisati cellulari o tissutali.
• Nell'immunofluorescenza su sezioni incluse in paraffina (IF-P), ottimizzare la recupero dell'antigene e la permeabilizzazione per rilevare efficacemente la mesotelina associata alla membrana o localizzata nel Golgi.
• Per le applicazioni ELISA, valutare le prestazioni dell'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento dopo test di accoppiamento empirici e convalidarlo rispetto alla mesotelina ricombinante o ai bersagli naturali in matrici appropriate.
• È riportata reattività incrociata per umano e ratto; quando si lavora con campioni di ratto, confermare specificità e sensibilità nelle proprie condizioni sperimentali, poiché la conservazione dell'epitopo può variare.

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