Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-Mesotelina per WB, IHC-P, ELISA - Q13421

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del Mesotelina

• Il Mesotelina è una glicoproteina di superficie cellulare codificata dal gene MSLN (ID Gene: 10232) che viene sintetizzata come precursore e scissa in una forma ancorata alla membrana e in un fattore potenziante dei megacariociti (MPF) secreto.
• La forma legata alla membrana è attaccata tramite un ancoraggio GPI e si ritiene che medii l'adesione cellulare, potenzialmente contribuendo alla metastasi tumorale e alla disseminazione peritoneale.
• Il frammento MPF secreto (noto anche come antigene CAK1) è stato dimostrato potenziare la formazione di colonie di megacariociti in vitro, indicando un ruolo nell'ematopoiesi.
• Il Mesotelina è localizzato principalmente alla membrana cellulare e all'apparato di Golgi, con una forma solubile scissa anche secreta extracellolarmente.
• A livello proteico, il mesotelina è altamente espresso nei mesoteliomi, nei tumori ovarici e in certi carcinomi a cellule squamose, mentre i tessuti normali mostrano un'espressione limitata nelle cellule mesoteliali, nel polmone e a bassi livelli nel cuore, nella placenta e nel rene.
• Le modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e fosforilazione; la proteina subisce anche scissione su una coppia di residui basici per produrre le forme mature.
• Lo splicing alternato del trascritto MSLN genera multiple isoforme, contribuendo alla diversità funzionale.
• Il Mesotelina serve come promettente biomarcatore tumorale e bersaglio terapeutico grazie al suo pattern di espressione differenziale e al suo coinvolgimento nella progressione del cancro.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato era una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 296–606 del Mesotelina umano (NP_037536.2). Questa regione copre la forma matura legata alla membrana, suggerendo che l'anticorpo possa riconoscere sia la forma ancorata alla membrana che i frammenti rilasciati.
• Per il Western blotting (WB), il rilevamento del mesotelina endogeno è previsto a circa 69 kDa; tuttavia, a causa della glicosilazione e della scissione, potrebbero essere osservate bande multiple o una macchia sfumata. Considerare l'uso di controlli di deglicosilazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), deve essere prevista una colorazione della membrana nei tessuti mesoteliali e tumorali. La colorazione nucleare o citoplasmatica deve essere interpretata con cautela.
• Per le applicazioni ELISA, l'abbinamento di questo anticorpo con un anticorpo di rilevamento mirato a un epitopo non sovrapposto può aiutare ad evitare la competizione. Validare le prestazioni nel sistema di campioni pertinente utilizzando proteine ricombinanti o lisati di cellule tumorali.

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