Anticorpo policlonale anti-MET di coniglio per WB e ELISA - P08581

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del recettore del fattore di crescita epatocitario (MET)

• MET (c-Met, HGFR) è una tirosin-chinasi recettoriale transmembrana che lega specificamente il fattore di crescita epatocitario (HGF), innescando risposte cellulari pleiotropiche tra cui proliferazione, motilità (diffusione), morfogenesi e sopravvivenza.
• Dopo la dimerizzazione indotta da HGF, MET autofosforila i residui di tirosina citoplasmatici, creando siti di legame per proteine adattatrici come GRB2, GAB1 e SRC, che a loro volta attivano le cascate di segnalazione RAS/ERK, PI3K/AKT e PLCγ/PKC per guidare la riorganizzazione del citoscheletro e i programmi trascrizionali.
• La segnalazione di MET è essenziale durante l'embriogenesi (gastrulazione, migrazione dei mioblasti, sviluppo di fegato e rene) e nei processi postnatali come la guarigione delle ferite, la rigenerazione degli organi e l'omeostasi ossea.
• Il recettore MET maturo è un eterodimera costituito da una catena α extracellulare e una catena β transmembrana a passaggio singolo che ospita il dominio tirosin-chinasico; è localizzato principalmente sulla membrana plasmatica e una forma solubile può essere generata tramite distacco dell'ectodominio.
• Negli esseri umani, MET è ampiamente espresso nelle cellule epiteliali di fegato, tratto gastrointestinale, tiroide, rene e pelle, con livelli particolarmente elevati in epatociti, epiteli gastrico e intestinale e cheratinociti basali; a livello proteico è presente anche nel cervello e nell'osso metafisario.
• Come recettore di ingresso per Listeria monocytogenes tramite la sua interazione con l'internelina InlB, MET illustra un meccanismo fisiopatologico di invasione microbica; la sua attivazione aberrante (tramite mutazioni, amplificazione genica o sovraespressione) è implicata nella trasformazione oncogena, rendendolo un importante bersaglio terapeutico.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione citoplasmatica (amminoacidi 960–1161) della MET umana, che contiene le sequenze del dominio chinasico; questa regione è altamente conservata tra uomo e ratto, il che giustifica la reattività incrociata osservata.
• Per l'analisi Western blot si possono utilizzare lisati da linee cellulari note per esprimere MET (ad esempio A549, HeLa o linee epatocitarie) o campioni di tessuto (fegato, rene); ci si aspetta bande intorno ai 156 kDa, eventualmente accompagnate da bande aggiuntive che rappresentano forme glicosilate o clivate.
• Durante l'esecuzione dell'ELISA, valutare l'utilizzo dell'anticorpo come reagente di cattura o rilevamento in un formato sandwich con un anticorpo monoclonale accoppiato; si consiglia di ottimizzare la concentrazione di coating e le condizioni di rilevamento.
• Poiché MET è un recettore transmembrana, preparazioni di membrana arricchite o immunoprecipitazione possono migliorare il segnale in WB; si consigliano tamponi di lisi contenenti detergenti non denaturanti (ad esempio 1% Triton X-100) per preservare gli epitopi.

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