Anticorpo Monoclonale Anti-METTL14 (Validato KD) per WB, IHC-P, IP, ELISA - Q9HCE5

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di METTL14

• METTL14 (proteina simile alla metiltransferasi 14, nota anche come hMETTL14) è la subunità non catalitica del complesso N6-adenosina-metiltransferasi.
• Nell'eterodimero con METTL3, METTL14 funge da impalcatura di legame all'RNA che riconosce l'mRNA substrato, mentre METTL3 fornisce l'attività catalitica (PubMed:27281194, PubMed:27373337, PubMed:27627798). Riferimenti correlati: PMID:27281194, PMID:27373337, PMID:27627798
• Il complesso catalizza la modifica N6-metiladenosina (m6A) su residui di adenina all'interno del motivo consenso 5'-[AG]GAC-3', regolando la stabilità e il processo dell'mRNA (PubMed:24316715, PubMed:24407421, PubMed:25719671). Riferimenti correlati: PMID:24316715, PMID:24407421, PMID:25719671
• La metilazione m6A agisce come regolatore chiave della stabilità dell'mRNA promuovendo la destabilizzazione e la degradazione dei trascritti, influenzando le dinamiche di espressione genica.
• La m6A mediata da METTL14 è fondamentale per la regolazione dell'orologio circadiano, la differenziazione delle cellule staminali embrionali e la neurogenesi corticale (PubMed:24316715, PubMed:24407421, PubMed:25719671). Riferimenti correlati: PMID:24316715, PMID:24407421, PMID:25719671
• La proteina si localizza prevalentemente nel nucleo.
• METTL14 è anche coinvolta nella spermatogenesi e nella fertilità maschile, regolando la differenziazione spermatogonia e la meiosi (Per similarità).
• METTL14 è una fosfoproteina identificata in analisi proteomiche, con un peso molecolare previsto di 52.150 Da.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 1-210 della METTL14 umana (NP_066012.1). Poiché questa regione si trova all'estremità N-terminale, valuta la sua conservazione tra le specie se si desidera una reattività incrociata; l'allineamento di sequenza può aiutare a prevedere la reattività in specie aggiuntive.
• Per Western blot (WB), è previsto una singola banda a circa 52 kDa. Convalidare la rilevazione nei lisati di tessuti/cellule della specie appropriata, inclusi uomo, topo e ratto.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), METTL14 mostra colorazione nucleare. Ottimizzare le condizioni di recupero dell'antigene e considerare l'uso di tessuti noti positivi (es. cervello, testicolo) come controlli.
• Per immunoprecipitazione (IP), questo anticorpo monoclonale di coniglio può catturare in modo efficiente i complessi di METTL14; includere appropriati controlli isotipici e confermare la co-immunoprecipitazione di METTL3 se si studia l'eterodimero della metiltransferasi.
• ELISA: l'anticorpo può essere utilizzato come anticorpo di cattura o di rilevazione se abbinato a un secondario compatibile per la quantificazione di METTL14; convalidare l'intervallo dinamico e la specificità del saggio.

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