Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-METTL3 [KD Validato] per WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - Q86U44

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di METTL3

• METTL3 (sottounità catalitica N(6)-adenosina-metiltransferasi) è una proteina da 64 kDa che localizza negli speckles nucleari e nel citoplasma. Forma un complesso eterodimerico con METTL14 che costituisce il nucleo catalitico per il deposito di modifiche m6A sull'RNA.
  Riferimenti correlati:
  PMID:27281194
  PMID:27373337
  PMID:27627798
• METTL3 deposita m6A alla sequenza consenso 5′-[AG]GAC-3′ sull'mRNA, regolando la stabilità dei trascritti, il processamento, l'efficienza di traduzione e la modifica.
  Riferimenti correlati:
  PMID:22575960
  PMID:24284625
  PMID:25719671
• Il marcatore m6A promuove la destabilizzazione e la degradazione dell'mRNA una volta che gli mRNA vengono rilasciati nel nucleoplasma, consentendo il controllo dinamico dell'espressione genica.
  Riferimenti correlati:
  PMID:28637692
• Nelle cellule staminali embrionali, la metilazione m6A dei trascritti associati alla pluripotenza da parte di METTL3 ne guida il decadimento, facilitando così l'uscita dallo stato naïve e la differenziazione.
• METTL3 contribuisce alla regolazione dell'orologio circadiano accelerando il processamento nucleare degli mRNA dei geni dell'orologio e modulando il metabolismo lipidico epatico.
  Riferimenti correlati:
  PMID:30428350
• In seguito a danni al DNA indotti da UV, METTL3 viene rapidamente reclutato nei siti di danno dove catalizza m6A sui trascritti pol(A), promuovendo il reclutamento della DNA polimerasi κ (POLK).
  Riferimenti correlati:
  PMID:28297716
• Nel citoplasma, METTL3 interagisce con i fattori di inizio della traduzione per migliorare la traduzione dell'mRNA indipendentemente dalla sua attività metiltransferasica; questa funzione è associata alla proliferazione delle cellule tumorali.
  Riferimenti correlati:
  PMID:27117702
• Durante l'infezione da SARS‑CoV‑2, METTL3 aggiunge modifiche m6A all'RNA virale, riducendo il legame di RIG‑I e quindi smorzando la sensing immunitaria innata.
  Riferimenti correlati:
  PMID:33961823

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N‑terminale (aminoacidi 1–156) di METTL3 umano. Quando si utilizza questo anticorpo, considerare che potrebbe riconoscere epitopi all'interno di questo frammento; validare il legame al METTL3 a lunghezza intera e ai potenziali isoforme nel proprio sistema di campione.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~64 kDa. Ottimizzare la percentuale del gel (es. 10% SDS‑PAGE) e le condizioni di trasferimento per proteine di medie dimensioni. Utilizzare controlli positivi e negativi appropriati.
• L'idoneità riportata dell'anticorpo per ChIP suggerisce che può immunoprecipitare complessi METTL3–RNA o cromatina; regolare con precisione il cross‑linking, la sonicazione e la severità di lavaggio per il proprio protocollo specifico.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC) e nell'istochimica immunologica (IHC‑P), le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per preservare l'epitopo consentendo al contempo l'accesso dell'anticorpo.
• Sono elencate molteplici applicazioni; tuttavia, ogni laboratorio dovrebbe stabilire e ottimizzare le prestazioni dell'anticorpo nelle proprie condizioni sperimentali.

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