Anticorpo policlonale Anti-METTL4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q8N3J2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di METTL4

• METTL4 (proteina 4 simile alla metiltransferasi) è una metiltransferasi specifica per N(6)-adenina capace di modificare sia molecole di RNA che di DNA. Riferimenti correlati: PMID:31913360, PMID:32183942

• Catalizza la formazione di N6,2'-O-dimetiladenosina (m6A(m)) in posizioni interne dell'RNA nucleare piccolo U2 (snRNA), una modificazione che regola lo splicing del pre-mRNA. Riferimenti correlati: PMID:31913360

• METTL4 funziona anche come metiltransferasi di N(6)-adenina del DNA, sebbene il ruolo biologico della m6A sul DNA mammifero rimanga sotto indagine e richieda ulteriori conferme. Riferimenti correlati: PMID:32183942, PMID:32203414

• Nella matrice mitocondriale, METTL4 metila il DNA mitocondriale (mtDNA), reprimendo la trascrizione inibendo il legame di TFAM e la piegatura del DNA, influenzando così il numero di copie del mtDNA e l'espressione dei geni mitocondriali. Riferimenti correlati: PMID:32183942

• L'enzima contribuisce al silenziamento Polycomb promuovendo l'ubiquitinazione e la degradazione di ASXL1 e MPND, portando all'inattivazione del complesso PR-DUB (Per somiglianza).

• A livello subcellulare, METTL4 si localizza nel nucleo, nel citosol e nella matrice mitocondriale, riflettendo il suo coinvolgimento sia nella metilazione degli acidi nucleici nucleari che mitocondriali.

• Come membro della famiglia delle metiltransferasi, utilizza S-adenosil-L-metionina come donatore di metile ed è implicato nella regolazione della cromatina.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Design dell'immunogeno: L'anticorpo è stato prodotto contro una proteina ricombinante che comprende la regione N-terminale (aa 1-190) del METTL4 umano, un segmento che mostra conservazione tra umano, topo e ratto, supportando la reattività crociata.
• Western blotting: In WB, è prevista una banda vicino a 54 kDa; utilizzare lisati cellulari interi o arricchiti di mitocondri e titolare l'anticorpo per un rapporto segnale/rumore ottimale.
• IHC-P / IF-ICC: Per la colorazione, suggeriamo passaggi di recupero dell'antigene e permeabilizzazione, e la convalida in tessuti o linee cellulari che esprimono METTL4.
• ELISA: Questo anticorpo può essere impiegato in formati ELISA a sandwich o diretti; includere appropriati standard di proteina ricombinante per la quantificazione.
• Reattività crociata: Sebbene sia riportata la reattività con umano, topo e ratto, gli utenti finali dovrebbero verificare le prestazioni nel loro specifico tipo di campione e specie.

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