Anticorpo policlonale di coniglio anti-METTL7B per WB, IF/ICC, ELISA - Q6UX53

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di METTL7B

• METTL7B, noto anche come TMT1B (Tiolo S-metiltransferasi TMT1B) o proteina simile alla metiltransferasi 7B, è un enzima tiolo S-metiltransferasi che catalizza il trasferimento di gruppi metilici da S-adenosil-L-metionina (SAM) a substrati contenenti tioli.
• Funziona principalmente nel reticolo endoplasmatico degli epatociti, rappresentando la maggior parte dell'attività di metilazione S-tiolica e metilando selettivamente nucleofili a centro zolfo come l'idrogeno solfuro e il ditiotreitolo.
• La localizzazione subcellulare include la membrana del reticolo endoplasmatico, le gocce lipidiche, i microsomi e il citosol, riflettendo il suo coinvolgimento nei processi metabolici associati alle membrane.
• La proteina è espressa prevalentemente nel fegato, in linea con il suo ruolo nel metabolismo epatico dei tioli, e ha un peso molecolare calcolato di circa 27,8 kDa (UniProt).
• Come membro della superfamiglia delle metiltransferasi, METTL7B contiene un dominio conservato di metiltransferasi dipendente da SAM e un peptide segnale per il targeting verso le membrane cellulari.
• Le sue funzioni sono fondamentali per mantenere l'omeostasi dei tioli cellulari e possono influenzare il metabolismo lipidico all'interfaccia tra reticolo endoplasmatico e gocce lipidiche.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 165–244 di METTL7B umano, una regione che si trova probabilmente all'interno del dominio catalitico della metiltransferasi; tenere conto di questo quando si valuta la potenziale reattività crociata o i controlli con peptide bloccante.
• Per Western blot è attesa una banda intorno ai 28 kDa; convalidare la specificità utilizzando linee cellulari derivate dal fegato (es. HepG2) come controlli positivi e campioni di knockdown/knockout.
• Nell'immunofluorescenza o nell'ICC, aspettarsi un pattern di colorazione coerente con la localizzazione nel reticolo endoplasmatico e nelle gocce lipidiche; utilizzare marcatori di organelli per la verifica della co-localizzazione.
• L'anticorpo è policlonale e può presentare variabilità tra lotti; ottimizzare le condizioni di diluizione e incubazione per ogni nuovo lotto e applicazione.
• Le applicazioni ELISA possono trarre vantaggio dall'utilizzo dell'immunogeno proteico ricombinante come standard per quantificare i livelli di METTL7B in fluidi biologici o lisati.
• Poiché l'espressione di METTL7B è specifica per il fegato, verificare i livelli endogeni nelle cellule non epatiche per stabilire la colorazione di base o il fondo per i vostri saggi.

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