Anti-METTL8 Coniglio Anticorpo Policlonale per WB, ELISA - Q9H825

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di METTL8

• METTL8 (proteina 8 simile a metiltransferasi) è nota anche come tRNA N(3)-citidina metiltransferasi METTL8, mitocondriale, e mRNA N(3)-metilcitidina metiltransferasi METTL8. Appartiene alla superfamiglia delle metiltransferasi e utilizza S-adenosil-L-metionina (SAM) come donatore di metile.
• Come enzima mitocondriale, METTL8 catalizza specificamente la modifica N(3)-metilcitidina (m3C) in posizione 32 dell'anello dell'anticodone del tRNA(Ser)(UCN) mitocondriale e del tRNA(Thr). Questa modifica è cruciale per l'efficienza della traduzione mitocondriale e la corretta funzione della catena respiratoria. Riferimenti correlati: PMID:34774131, PMID:35017528
• L'attività di metilazione di METTL8 sul tRNA(Ser)(UCN) mitocondriale richiede la precedente modifica N(6)-dimetilalliladenosina(37) (i6A37) da parte dell'enzima TRIT1, indicando una via di modifica gerarchica. Riferimenti correlati: PMID:34774131, PMID:35017528
• È stato riportato che METTL8 media la modifica m3C su certi mRNA, ma la prevalenza e il significato biologico di questa attività in vivo rimangono incerti e richiedono ulteriore validazione. Riferimenti correlati: PMID:28655767, PMID:33313824
• A livello subcellulare, METTL8 si localizza prevalentemente nei mitocondri, coerentemente con il suo ruolo nella modifica del tRNA mitocondriale. La proteina possiede un peptide di transito per l'importazione mitocondriale.
• Il gene METTL8 subisce splicing alternativo, potenzialmente producendo multiple isoforme. UniProt elenca l'isoforma revisionata con un peso molecolare di circa 33,4 kDa.
• Le caratteristiche chiave della proteina includono la formazione di legami isopeptidici, la coniugazione Ubl e la classificazione sotto le parole chiave di elaborazione del tRNA e mitocondriale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato per questo anticorpo è una proteina ricombinante che copre la regione N-terminale (amminoacidi 1-140) di METTL8 umano. Questa regione può includere parti del peptide di transito e del dominio catalitico iniziale.
• Per le applicazioni di Western blot (WB), considerare l'utilizzo di lisati arricchiti di mitocondri o estratti cellulari totali da campioni umani, di topo o di ratto. Il peso molecolare previsto è di ~33 kDa, ma le modificazioni post-traduzionali o le variazioni delle isoforme possono spostare la banda.
• Nell'ELISA, questo anticorpo policlonale può rilevare METTL8 nativo e denaturato. Validare la specificità del segnale utilizzando controlli appropriati, come linee cellulari con knockdown o knockout di METTL8.
• È stata indicata la reattività incrociata con METTL8 di topo e ratto; tuttavia, l'omologia di sequenza dovrebbe essere verificata e le condizioni di lavoro ottimali dovrebbero essere determinate empiricamente nel proprio sistema sperimentale.
• Per studi funzionali che collegano METTL8 alla traduzione mitocondriale o all'attività della catena respiratoria, considerare l'utilizzo di questo anticorpo in congiunzione con l'isolamento mitocondriale e saggi di attività.

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