Anticorpo monoclonale anti-MFG-E8 per WB, IF/ICC, ELISA - Q08431

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di MFG-E8

• La lattaderina (MFG-E8) è una glicoproteina da 43 kDa codificata dal gene MFGE8; lo splicing alternativo può produrre molteplici isoforme, tuttavia la forma principale contiene costantemente domini di tipo EGF e di tipo discoidina F5/8 C.
• Promuove l'omeostasi dell'epitelio intestinale e la guarigione della mucosa, supportando al contempo la neovascolarizzazione VEGF-dipendente (angiogenesi).
• MFG-E8 funge da molecola ponte chiave per la clearance fagocitica delle cellule apoptotiche: si lega alla fosfatidilserina sulle cellule morenti e interagisce con le integrine αvβ3 e αvβ5 sui fagociti.
• La proteina può attaccarsi direttamente alle membrane arricchite di fosfatidilserina in modo indipendente dal recettore e interagisce con la zona pellucida, suggerendo un ruolo nel legame spermatozoo-ovocita.
• È un costituente principale dell'amiloide mediale aortica, collegandolo ai depositi vascolari patologici.
• A livello subcellulare, MFG-E8 si trova sulla membrana cellulare, secreto nello spazio extracellulare e all'interno di vescicole citoplasmatiche/secretorie, nonché nella membrana dell'acrosoma.
• La specificità tissutale include le cellule epiteliali mammarie, la tonaca media aortica e la sovraespressione in diversi carcinomi; è presente anche nei globuli di grasso del latte.
• Le modifiche post-traduzionali includono ponti disolfuro, glicosilazione e fosforilazione; la proteina è classificata sotto parole chiave come amiloide, angiogenesi, adesione cellulare, fecondazione e proteoma di riferimento secreto.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il dominio C-terminale (amminoacidi 231–387) di MFG-E8 umano, che dovrebbe generare anticorpi in grado di riconoscere la proteina full-length di ~43 kDa nel western blotting; considerare il caricamento di 20–30 µg di lisato ridotto.
• Grazie alla reattività crociata con topo e ratto, l'anticorpo è adatto per studi su più specie; validare sempre i livelli di espressione nel sistema di campioni scelto.
• Per IF/ICC, si raccomanda la permeabilizzazione poiché MFG-E8 si localizza su membrane e vescicole; ottimizzare la fissazione e la diluizione dell'anticorpo per ridurre al minimo il background.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può fungere da reagente di cattura o di rilevamento; l'abbinamento con un secondo anticorpo che riconosce un epitopo distinto può migliorare la sensibilità.

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