Anticorpo policlonale Anti-Mfsd2a da coniglio per WB, ELISA - Q9DA75

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Mfsd2a

• Mfsd2a (proteina 2A contenente dominio della superfamiglia dei trasportatori facilitati major facilitator superfamily), noto anche come NLS1, è un symporter sodio-dipendente di lisofosfatidilcolina (LPC) essenziale per la formazione e la funzione della barriera ematoencefalica. Riferimenti correlati: PMID:18694395, PMID:23209793, PMID:24828040

• Trasporta specificamente la LPC nel cervello, che è la via principale per l'ingresso dell'acido docosaesaenoico (DHA), un acido grasso omega-3 fondamentale per la crescita cerebrale normale e la funzione cognitiva. Riferimenti correlati: PMID:24828040, PMID:24828044, PMID:34349262

• Mfsd2a trasporta specie di LPC con lunghezze della catena acilica di almeno 14 carboni, come LPC oleato e LPC palmitato, ma non trasporta DHA non esterificato. Riferimenti correlati: PMID:24828044, PMID:34349262

• Appartiene alla superfamiglia dei trasportatori facilitati major facilitator superfamily (MFS) e si prevede che contenga 12 eliche transmembrana, coerente con la sua funzione di trasportatore.

• Subcellullarmente, Mfsd2a si localizza sulla membrana cellulare e sulla membrana del reticolo endoplasmatico, a conferma del suo ruolo nell'assorbimento dei lipidi e nel traffico intracellulare.

• La proteina è ampiamente espressa ma arricchita nell'endotelio dei microvasi cerebrali che formano la barriera ematoencefalica, e presenta un'espressione oscillatoria circadiana nel tessuto adiposo bruno e nel fegato.

• Mfsd2a non è richiesto per la morfogenesi vascolare del sistema nervoso centrale, il che evidenzia il suo specifico ruolo di trasporto piuttosto che di sviluppo. Riferimenti correlati: PMID:24828040

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per Western blot (WB), utilizzare lisati proteici da cervello, fegato o tessuto adiposo bruno, dove Mfsd2a è altamente espresso. Considerare l'arricchimento delle frazioni di membrana per migliorare la rilevazione.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo tramite silenziamento con siRNA o knockout mediato da CRISPR di Mfsd2a nelle linee cellulari pertinenti.
• Per ELISA, ottimizzare l'antigene di coating utilizzando proteina ricombinante Mfsd2a o un peptide contenente la regione dell'immunogeno (amminoacidi 170-245).
• A causa della natura policlonale, valutare la variabilità da lotto a lotto per saggi quantitativi riproducibili.
• Garantire la spedizione a freddo e la conservazione alle temperature consigliate per mantenere l'attività dell'anticorpo.

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