Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-MGMT per WB, ELISA - P16455

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MGMT

• Il nome ufficiale della proteina è Methylated-DNA--protein-cysteine methyltransferasi, comunemente nota come O-6-metilguanina-DNA metiltransferasi (MGMT). È anche indicata come O-6-metilguanina-DNA-alchiltransferasi.
• MGMT è un enzima chiave per la riparazione del DNA che fornisce alla cellula una difesa contro gli effetti mutageni e citotossici degli agenti alchilanti. Rimuove specificamente i gruppi metile dall'O6-metilguanina (O6-MeG) e dall'O4-metiltimina (O4-MeT) nel DNA.
• Il meccanismo di riparazione prevede un trasferimento stechiometrico del gruppo metile dalla base nucleotidica danneggiata a un residuo di cisteina nel sito attivo dell'enzima. Si tratta di una reazione suicida, poiché l'enzima viene irreversibilmente inattivato dopo un singolo turno catalitico.
• MGMT è localizzata prevalentemente nel nucleo, dove entra in contatto con le lesioni del DNA genomico.
• La proteina lega uno ione zinco per subunità e la coordinazione dello zinco è probabilmente importante per la sua integrità strutturale.
• MGMT è regolata tramite fosforilazione, come indicato dalla sua classificazione come fosfoproteina.
• Le parole chiave associate a MGMT includono danno al DNA, riparazione del DNA, metiltransferasi, transferasi, legame metalli e proteoma di riferimento, che sottolineano il suo ruolo consolidato nel mantenimento della stabilità genomica.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo monoclonale di coniglio è stato generato contro un peptide antigenico che copre gli amminoacidi 108–207 della MGMT umana. È previsto che rilevi una banda di ~22 kDa in Western blot in condizioni riducenti.
• Per il Western blotting, si consiglia di includere un controllo positivo come lisati cellulari umani noti per esprimere MGMT (ad esempio HeLa, HEK293). Un controllo del carico deve essere eseguito in parallelo.
• Per applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. I formati ELISA indiretti o sandwich possono essere ottimizzati; assicurarsi che l'antigene di coating presenti l'epitopo in modo appropriato.
• Poiché l'espressione di MGMT può variare tra tessuti e linee cellulari umane, validare l'anticorpo nel vostro sistema sperimentale per confermare reattività e specificità.
• L'anticorpo è validato per la reattività con l'uomo; la reattività crociata con altre specie non è stata testata, pertanto le prestazioni in modelli non umani non possono essere garantite.

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