Anticorpo Monoclonale Anti-MIPEP per WB, WB, IF/ICC, ELISA - Q99797

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Peptidasi Intermedia Mitocondriale (MIPEP)

• MIPEP, nota anche come MIP, HMIP e COXPD31, è una peptidasi intermedia mitocondriale che elabora le proteine precursori mitocondriali codificate nel nucleo dopo il loro importo.
• Si localizza specificamente nella matrice mitocondriale, dove cliva ottapeptidi N-terminali dalle forme intermedie delle proteine per generare le loro dimensioni mature e funzionali.
• MIPEP è una metalloproteasi dipendente dallo zinco che richiede cazioni bivalenti come Zn²⁺, Mn²⁺ o Mg²⁺ per l'attività catalitica.
• La proteina appartiene alla famiglia M3 delle metalloendopeptidasi ed è altamente conservata tra le specie, riflettendo il suo ruolo essenziale nella proteostasi mitocondriale.
• Le mutazioni nel gene MIPEP causano la carenza combinata della fosforilazione ossidativa 31 (COXPD31), una grave malattia mitocondriale con coinvolgimento multisistemico.
• Le modifiche post-traduzionali come l'acetilazione possono regolare l'attività o la stabilità di MIPEP all'interno della matrice mitocondriale.
• Come enzima chiave nella maturazione delle proteine mitocondriali, MIPEP influisce sull'assemblaggio della catena respiratoria, sulla produzione di ATP e sul metabolismo energetico cellulare generale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 511–713 di MIPEP umano; l'anticorpo può riconoscere la proteina a lunghezza intera (~81 kDa). Verificare la specificità utilizzando lisati arricchiti di mitocondri da linee cellulari umane (es. HeLa, HEK293) e considerare controlli di knockdown con siRNA.
• Per il Western blot, ottimizzare i buffer di estrazione per preservare le proteine mitocondriali e utilizzare campioni freschi o conservati correttamente per evitare la degradazione.
• In IF/ICC, combinare con un marcatore mitocondriale come Tom20 per una localizzazione inequivocabile. I passaggi di permeabilizzazione devono essere ottimizzati per gli antigeni della membrana mitocondriale.
• Le applicazioni ELISA possono essere fattibili per MIPEP nativa o ricombinante, ma si raccomanda un'ottimizzazione empirica delle condizioni di rivestimento e rilevamento.
• Come anticorpo monoclonale di coniglio, offre una riproducibilità coerente lotto-per-lotto e un'alta affinità, adatto per saggi quantitativi impegnativi.

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