Anticorpo Policlonale Anti-MKRN3 Coniglio per WB ed ELISA - Q13064

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MKRN3

• MKRN3 è una ligasi E3 ubiquitina a dito RING, nota anche come RNF63, ZNF127 e CPPB2, che svolge un ruolo critico nel tempismo riproduttivo.
• La proteina funge da timer di sviluppo chiave inibendo l'attivazione prematura della cascata ormonale riproduttiva, regolando specificamente l'espressione dell'ormone di rilascio delle gonadotropine (GNRH1) e la stabilità del suo mRNA.
• MKRN3 silenzia epigeneticamente la trascrizione di GNRH1 interrompendo il legame di MBD3 al promotore di GNRH1 tramite ubiquitinazione non proteolitica 'Lys27' di MBD3, modulando così la metilazione regionale. Riferimenti correlati: PMID:34692086
• Modula anche la traduzione e la stabilità dell'mRNA di GNRH1 attraverso l'ubiquitinazione non proteolitica dei membri della famiglia PABP (PABPC1, PABPC3, PABPC4) in più siti. Riferimenti correlati: PMID:33744966
• Inoltre, MKRN3 mantiene la stabilità genomica ed epigenomica regolando l'abbondanza di APEX2 tramite ubiquitinazione 'Lys-48', indirizzandola alla degradazione proteasomale. Riferimenti correlati: PMID:38705397
• La proteina si localizza prevalentemente nel nucleo, in linea con i suoi ruoli regolatori nella trascrizione e nella modulazione epigenetica.
• MKRN3 è espressa ubiquitariamente nei tessuti, indicando una funzione regolatoria ampia oltre il controllo neuroendocrino.
• Contiene caratteristici domini zinc-finger e un motivo dito RING, classificandola come una transferasi legante metalli nella via di coniugazione dell'ubiquitina.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (aa 1-260) di MKRN3 umano, potenzialmente permettendo il rilevamento di isoforme a lunghezza intera e N-terminali; convalidare la specificità nel proprio sistema campione.
• Per il Western blot, attendersi una banda intorno a 56 kDa; considerare l'uso di marcatori di peso molecolare e confermare l'identità con controlli knockdown o knockout.
• Questo anticorpo è riportato reagire in modo crociato con MKRN3 di topo, consentendone l'uso in modelli murini; verificare la reattività crociata nelle proprie condizioni sperimentali.
• Per l'ELISA, ottimizzare la diluizione dell'anticorpo e le condizioni di rivestimento dell'antigene attraverso una titolazione a scacchiera per ottenere il miglior rapporto segnale/rumore.
• L'anticorpo è adatto per rilevare sia eventi di ubiquitinazione proteolitica che non proteolitica che coinvolgono MKRN3; considerare saggi di co-IP o specifici per l'ubiquitina per studiare queste interazioni.

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