Anticorpo monoclonale Anti-MLH1 (convalidato KO) per WB, ELISA - P40692

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della proteina Mlh1 per la riparazione dei mismatch del DNA

• MLH1 codifica la proteina per la riparazione dei mismatch del DNA Mlh1 (omologo 1 della proteina MutL), una componente chiave del sistema di riparazione dei mismatch del DNA post-replicativo (MMR). È anche conosciuto con vari alias tra cui FCC2, COCA2 e HNPCC.
• MLH1 forma un eterodimero con PMS2 per creare MutL alfa. Dopo il riconoscimento dei mismatch da parte di MutS alfa (MSH2-MSH6) o MutS beta (MSH2-MSH3), MutL alfa viene reclutato sull'eteroduplex. In presenza di RFC e PCNA, attiva l'attività endonucleasica di PMS2, introducendo singole rotture del filamento vicino al mismatch per facilitare la degradazione specifica del filamento da parte di EXO1.
• MLH1 forma anche un eterodimero con MLH3 (MutL gamma) che è coinvolto nella ricombinazione meiotica.
• La proteina si localizza nel nucleo e si associa ai cromosomi, coerente con il suo ruolo nella riparazione del DNA e nel mantenimento dell'integrità genomica.
• L'espressione tissutale è ampia, con livelli più elevati rilevati nel colon, linfociti, mammella, polmone, milza, testicolo, prostata, tiroide, cistifellea e cuore.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione. MLH1 partecipa alla segnalazione del danno del DNA, che può indurre l'arresto del ciclo cellulare o l'apoptosi in seguito a danno grave del DNA. È classificato come soppressore tumorale e le mutazioni in MLH1 sono legate al cancro del colon-retto ereditario non poliposico (HNPCC).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno utilizzato è la proteina ricombinante MLH1 umana, che può produrre anticorpi in grado di riconoscere forme native e denaturate. Nel Western blot, è prevista una banda specifica intorno a 85 kDa in lisati di cellule o tessuti umani. Si raccomanda di includere un campione di controllo convalidato da knockout (KO) per confermare la specificità dell'anticorpo.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o la rilevazione dell'antigene; per lo sviluppo di ELISA sandwich, si consiglia di abbinarlo a un altro clone che bersagli un epitopo distinto. Utilizzare la proteina MLH1 ricombinante come standard per la quantificazione.
• Data la localizzazione nucleare di MLH1, protocolli appropriati di estrazione nucleare possono aumentare la sensibilità di rilevazione nel WB quando si utilizzano lisati di cellule intere.

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