Anticorpo monoclonale Anti-MLKL per WB, IHC-P, ELISA - Q8NB16

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MLKL

• MLKL (Mixed lineage kinase domain-like protein) è una pseudochinasi che svolge un ruolo critico nella necroptosi indotta dal fattore di necrosi tumorale (TNF), una via di morte cellulare programmata distinta dall'apoptosi. Riferimenti correlati: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• Manca di attività chinasi proteica intrinseca e funziona a valle di RIPK3. Dopo la fosforilazione da parte di RIPK3, MLKL subisce omotrimerizzazione e si trasloca alla membrana plasmatica, inducendo afflusso di calcio e danno alla membrana per eseguire la morte cellulare necroptotica. Riferimenti correlati: PMID:22265413, PMID:22265414, PMID:22421439
• MLKL media anche la necroptosi nucleare innescata da infezioni virali. Dopo l'attivazione da parte di ZBP1, RIPK3 nucleare fosforila MLKL, portando alla rottura dell'involucro nucleare e alla fuoriuscita del DNA cellulare nel citosol.
• La proteina lega fosfati di inositolo altamente fosforilati, come l'inositolo esachisfosfato (InsP6), essenziale per la sua funzione necroptotica. Riferimenti correlati: PMID:29883610
• MLKL si localizza nel citoplasma, nella membrana cellulare e nel nucleo, in linea con il suo ruolo dinamico nella segnalazione e nell'esecuzione della morte cellulare.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme di MLKL, potenzialmente contribuendo alla diversità regolatoria.
• Parole chiave associate a MLKL includono legame ATP, coil-coil, necrosi, fosfoproteina e legame nucleotidico, riflettendo i suoi domini strutturali e il ruolo nella segnalazione della necroptosi.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'anticorpo è stato generato contro un peptide sintetico di MLKL umano; può riconoscere sia le forme denaturate che native, supportando applicazioni come il Western blot (WB) e l'ELISA.
• Nel Western blot, ci si aspetta una banda a circa 54 kDa sia per MLKL umano che di topo; includere controlli positivi appropriati per confermare la specificità.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene potrebbero richiedere ottimizzazione, e si raccomanda la validazione utilizzando sezioni tissutali positive note.
• La reattività incrociata dell'anticorpo con MLKL di topo ne consente l'uso in modelli murini di necroptosi; tuttavia, le prestazioni dovrebbero essere validate nel sistema sperimentale rilevante.
• Poiché MLKL è una fosfoproteina, considerare il ruolo della fosforilazione nel vostro contesto sperimentale, poiché le modifiche indotte dall'attivazione possono influenzare il rilevamento.
• Per i saggi di necroptosi, indurre l'attivazione di MLKL richiede tipicamente trattamenti combinati (es. TNF-α, mimetico Smac e un inibitore delle caspasi); confermare lo stato di attivazione con controlli appropriati.

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