Anticorpo policlonale coniglio anti-MLL5/KMT2E per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - Q8IZD2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MLL5/KMT2E

• MLL5, noto anche come lettore di istoni KMT2E, è una istone-lisina N-metiltransferasi 2E inattiva che agisce come regolatore associato alla cromatina. Si lega all'istone H3 tri-metilata alla Lisi-4 (H3K4me3) tramite il suo dominio dito PHD, mediando l'interazione cromatinica a valle dei siti di inizio della trascrizione dei geni attivi. Riferimenti correlati: PMID:23798402 PMID:24130829

• Gioca un ruolo chiave nell'ematopoiesi, regolando la differenziazione terminale dei mieloidi e l'auto-rinnovo delle cellule staminali ematopoietiche attraverso un meccanismo che coinvolge la metilazione del DNA (Per similarità).

• MLL5 partecipa alla regolazione del ciclo cellulare in più fasi, inclusa la transizione G1/S, la progressione della fase S e l'ingresso in mitosi. Viene reclutato sui promotori responsivi all'E2F1 da HCFC1, dove stimola H3K4me3 e l'attivazione trascrizionale, facilitando la transizione dalla fase G1 alla fase S. Riferimenti correlati: PMID:14718661 PMID:18573682 PMID:19264965 PMID:23629655

• L'isoforma NKp44L funziona come ligando cellulare per il recettore di citotossicità naturale NCR2/NKp44, agendo potenzialmente come segnale di pericolo nell'immunità innata mediata dalle cellule NK.

• A livello subcellulare, MLL5 si localizza nel nucleo (nucleoplasma e speckles nucleari), ma può essere trovato anche nel citoplasma, nel centrosoma e nella membrana cellulare a seconda dell'isoforma e del contesto cellulare.

• La proteina è ampiamente espressa sia nei tessuti adulti che fetali, con i livelli più alti nel timo e nel rene fetali, e nei tessuti ematopoietici adulti, digiuno e cervelletto. L'isoforma NKp44L non viene rilevata sulle cellule circolanti sane ma è espressa su molte linee cellulari tumorali e trasformate. Riferimenti correlati: PMID:12101424 PMID:23958951

• Strutturalmente, MLL5 presenta un dominio SET (metiltransferasi inattiva), un dito PHD e regioni a coiled-coil, ed è soggetta a modificazioni post-traduzionali inclusa la fosforilazione e l'ubiquitinazione.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 200-500, una regione contenente il dominio dito PHD. Questo anticorpo potrebbe essere particolarmente adatto per rilevare MLL5 legato alla cromatina in applicazioni correlate a ChIP se adattato.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~205 kDa; considerare l'uso di un gel a bassa percentuale e tempi di trasferimento estesi. Validare la specificità con controlli appropriati, poiché esistono multiple isoforme.
• Nell'immunofluorescenza e nell'immunoistochimica, MLL5 può mostrare pattern di colorazione nucleare a speckles o centrosomiale a seconda del tipo cellulare e della fissazione. Includere passaggi di permeabilizzazione e colorazione concomitante con marcatori di organelli.
• Per l'ELISA, utilizzare la proteina immunogenica ricombinante come antigene di rivestimento positivo per stabilire le condizioni del saggio. La reattività crociata con MLL5 di topo e ratto può consentire test multi-specie.

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