Anticorpo policlonale anti-MLLT1/ENL per WB ed ELISA - Q03111

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di MLLT1/ENL

• ENL (MLLT1) è un lettore della cromatina contenente il dominio YEATS e un componente essenziale del complesso di super-elongazione (SEC), che potenzia la trascrizione mediata dall'RNA polimerasi II riducendo la pausa prossimale al promotore. Riferimenti correlati: PMID:20159561, PMID:20471948
• Il dominio YEATS di ENL si lega preferenzialmente agli istoni crotonilati, con un'affinità maggiore per l'istone H3 crotonilato sulla lisina 27 (H3K27cr) rispetto alla lisina 20 (H3K9cr20). Riferimenti correlati: PMID:27105114
• Nella leucemia mieloide acuta (AML), ENL agisce come un lettore critico della cromatina riconoscendo gli istoni acetilati, promuovendo l'espressione genica oncogenica e la leucemogenesi. Riferimenti correlati: PMID:39794553
• ENL è localizzato principalmente nel nucleo, in accordo con il suo ruolo nella regolazione trascrizionale.
• La proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, fosforilazione e coniugazione simile all'ubiquitina, che possono modulare le sue attività di legame alla cromatina e trascrizionali.
• ENL è implicato in riarrangiamenti cromosomici come la traslocazione t(11;19), che porta alla formazione di proteine di fusione associate alle leucemie a linea mista.
• Il peso molecolare di ENL umano è di circa 62 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 190–270 di MLLT1 umano, una regione che potrebbe trovarsi all'interno del dominio YEATS conservato; la reattività crociata con topo e ratto suggerisce una conservazione della sequenza, ma è necessario verificare gli allineamenti quando si estende l'analisi ad altre specie.
• Per il western blot, si prevede una banda intorno a 62 kDa; validare utilizzando lisati cellulari o tissutali positivi e negativi appropriati e considerare l'uso di estratti nucleari per arricchire il target.
• L'ottimizzazione dell'ELISA può richiedere la titolazione sia dell'antigene di rivestimento sia dell'anticorpo; l'inclusione di fasi appropriate di blocco e lavaggio può contribuire a ridurre al minimo il fondo.
• Considerato il ruolo di ENL nella leucemia, si possono prendere in considerazione modelli cellulari pertinenti (ad esempio linee cellulari di AML) per la validazione funzionale, ma è sempre necessario confermare l'espressione e la specificità nel proprio sistema sperimentale.

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