Anticorpo policlonale di coniglio Anti-MMP1 per WB, ELISA - P03956

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MMP1

• MMP1 (collagenasi interstiziale o collagenasi dei fibroblasti) è un membro della famiglia delle metalloproteinasi della matrice che taglia i collagene I, II e III in un singolo sito elicoidale, oltre ai collagene VII e X.
  Riferimenti correlati:
  PMID:1645757 PMID:2153297 PMID:2557822

• Durante l'infezione da HIV, MMP1 interagisce e taglia la proteina virale Tat secreta, riducendo la neurotossicità mediata da Tat.
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  PMID:16807369

• Sintetizzato come zimogeno inattivo (pro-MMP1), l'attivazione richiede la scissione autocatalitica del propeptide, regolata dal interruttore a cisteina e dal motivo di legazione dello zinco.

• L'enzima secreto si localizza nello spazio extracellulare e nella matrice extracellulare, dove media la degradazione del collagene e il rimodellamento tissutale.

• Strutturalmente, MMP1 possiede un peptide segnale, un propeptide, un dominio catalitico con un sito di legazione dello zinco e un dominio simile all'emopexina; è una glicoproteina con legami disolfuro stabilizzanti.

• Le modificazioni post-traduzionali includono la fosforilazione e probabilmente la glicosilazione, che possono influenzare l'attività enzimatica e le interazioni extracellulari.

• Il gene umano MMP1 codifica una proteina con un peso molecolare calcolato di circa 54 kDa, che agisce come metalloproteasi dipendente dal calcio.

• MMP1 partecipa al ricambio della matrice extracellulare, contribuendo a processi come la guarigione delle ferite, lo sviluppo embrionale e la distruzione patologica della matrice.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogene (aa 20-280) attraversa i domini propeptidico e catalitico, e potenzialmente riconosce sia la forma pro che quella attiva di MMP1, rendendolo adatto per la rilevazione totale di MMP1 in WB.
• In condizioni di WB riducente, la forma pro (~54 kDa) e quella attiva (~44 kDa) possono essere risolte; convalidare le dimensioni delle bande con controlli appropriati.
• Per l'ELISA, considerare l'abbinamento di questo anticorpo con un anticorpo di cattura monoclonale targeting un epitopo distinto per aumentare la specificità; testare la reattività crociata nella matrice di campione pertinente.
• I surnatanti di coltura cellulare o gli omogeneizzati tissutali sono i tipi di campione consigliati; per la rilevazione intracellulare, un inibitore della secrezione (es. brefeldina A) può migliorare il segnale.
• Includere controlli positivi (es. fibroblasti stimolati con PMA) e controlli negativi per confermare l'induzione di MMP1 e la specificità dell'anticorpo.

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