Anticorpo policlonale coniglio anti-MMP10 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P09238

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del MMP10

• MMP10 (Stromelysin-2) è noto anche come metalloproteinasi della matrice-10 (MMP-10) o Transin-2, codificato dal gene MMP10.
• È una endopeptidasi secretoria dipendente dallo zinco che degrada vari componenti della matrice extracellulare, inclusi la fibronectina, le gelatine di tipo I, III, IV e V, e debolmente i collageni III, IV e V.
• MMP10 può attivare la procollagenasi, partecipando così alla cascata proteolitica che rimodella la matrice extracellulare.
• Come membro della famiglia delle metalloproteinasi della matrice, condivide caratteristiche strutturali come un peptide segnale, un dominio propeptide e un dominio catalitico con siti di legame allo zinco e al calcio conservati.
• A livello subcellulare, MMP10 viene secreto nello spazio extracellulare e si localizza alla matrice extracellulare, coerentemente con il suo ruolo nel turnover della matrice.
• L'enzima viene sintetizzato come uno zimogeno inattivo e richiede un clivaggio proteolitico per l'attivazione, un meccanismo di regolazione tipico delle MMP.
• Le modifiche post-traduzionali includono la formazione di legami disolfuro, e la proteina contiene strutture ripetute caratteristiche e motivi di legame ai metalli essenziali per la sua attività idrolitica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una regione all'interno della proteina matura (amminoacidi 237–476), che può riconoscere sia la pro-forma che l'enzima attivo senza preferenza. Validare nel proprio sistema modello se è necessaria una rilevazione specifica per la forma attiva.
• Per il Western blotting, prevedere una banda vicino a 54 kDa (precursore) o leggermente inferiore per la forma matura dopo l'attivazione; si raccomandano condizioni riducenti.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), il recupero dell'antigene mediante tampone citrato o EDTA mediato dal calore può migliorare il segnale; i livelli di espressione tissutale possono essere variabili, quindi controlli appropriati sono essenziali.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), i protocolli di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzati, poiché MMP10 è secreto e potrebbe richiedere un agente di blocco del Golgi per migliorare la ritenzione intracellulare.
• Quando utilizzato in ELISA, la natura policlonale può fornire una cattura/rilevazione sensibile, ma la reattività crociata con altre MMP dovrebbe essere valutata data l'omologia di sequenza all'interno della famiglia.
• Come anticorpo policlonale, la coerenza da lotto a lotto può variare; è consigliabile titolare ogni nuovo lotto e confermare la reattività attraverso le specie previste (umano, topo, ratto).

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