Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-MMP12 per WB, IF/ICC, ELISA - P39900

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MMP12

• La metalloelastasi dei macrofagi (MMP-12, nota anche come ME, HME, MMP12) è una metalloproteinasi della matrice secreta che appartiene alla famiglia delle endopeptidasi zinco-dipendenti.
• MMP-12 mostra una significativa attività elastolitica ed è coinvolta nel danno tissutale e nel rimodellamento, con una preferenza per la leucina nel sito P1' e residui aromatici/idrofobici in P1.
• L'enzima è espresso principalmente nei macrofagi alveolari e non viene rilevato nei monociti del sangue periferico, sottolineando il suo ruolo nell'omeostasi del tessuto polmonare e nell'infiammazione.
• A livello subcellulare, MMP-12 viene secreta nello spazio extracellulare e si localizza nella matrice extracellulare, dove degrada l'elastina e altri componenti della matrice.
• Come membro della famiglia delle MMP, contiene domini caratteristici tra cui un pro-peptide che mantiene la latenza (forma zimogena), e richiede ioni calcio e zinco per l'attività.
• Le caratteristiche strutturali includono legami disolfuro e glicosilazione, come indicato dalle parole chiave UniProt; è stata determinata una struttura 3D.
• La proteina a lunghezza intera ha un peso molecolare previsto di ~54 kDa (calcolato 54002 Da), che corrisponde alla banda osservata nel Western blot.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno era un peptide sintetico corrispondente ai residui 200-300 di MMP-12 umano (NP_002417.2). Quando si progettano esperimenti, considerare che questa regione si trova all'interno del dominio catalitico e può riconoscere sia le forme pro che quelle attive, ma non si sovrappone al peptide segnale.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 54 kDa; tuttavia, la glicosilazione può causare lievi spostamenti nella migrazione. Convalidare la dimensione della banda osservata nel vostro specifico sistema campione.
• Nell'IF/ICC, MMP-12 è secreta, quindi le condizioni di permeabilizzazione e fissazione dovrebbero essere ottimizzate per mantenere il segnale associato alla matrice extracellulare. La co-colorazione con marcatori dei macrofagi può aiutare a confermare la specificità nelle sezioni tissutali.
• Per le applicazioni ELISA, si consigliano MMP-12 ricombinante o standard proteici purificati per stabilire curve standard e valutare l'efficienza di legame dell'anticorpo.

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