Anticorpo monoclonale coniglio Anti-MMP13 per WB, IF/ICC, ELISA - P45452

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MMP13

• La collagenasi 3 (MMP-13) è una metalloproteinasi della matrice secreta, codificata dal gene MMP13, con una massa molecolare prevista di 53,8 kDa e una banda osservata di ~54 kDa nel western blotting.
• Principalmente cliva i collageni fibrillari a tripla elica, mostrando la massima attività contro il collagene solubile di tipo II, ma degrada anche i collageni di tipo I, III, IV, X e XIV, oltre alla fibronectina e la tenascina.
• MMP13 appartiene alla famiglia delle metalloproteasi dipendenti da zinco e calcio; richiede il calcio per la stabilità e contiene domini conservati tipici delle MMP.
• L'enzima viene secreta nello spazio extracellulare e nella matrice, dove svolge le sue funzioni catalitiche.
• L'espressione è rilevata nella cartilagine fetale, condrociti ipertrofici, osteoblasti, cellule periostee e linfociti T attivati; viene trovata anche nel tessuto di carcinoma mammario.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione e glicosilazione; la forma zimogena contiene un peptide segnale e legami disolfuro conservati.
• MMP13 è essenziale per il normale sviluppo osseo embrionale, l'ossificazione dello scheletro e la guarigione delle fratture ossee; promuove anche la migrazione dei cheratinociti nella guarigione delle ferite e può facilitare l'invasione delle cellule tumorali.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico corrispondente ai residui 350–450 della MMP13 umana, situato in una regione probabilmente conservata nell'enzima attivo.
• Per il western blotting, in condizioni riducenti si osserva tipicamente una singola banda vicino a 54 kDa; convalidare l'espressione in linee cellulari o lisati di tessuto appropriati.
• Nell'immunofluorescenza/ICC ci si aspetta il segnale nella matrice extracellulare e nella via secretoria; si consiglia di considerare la co-colorazione con marcatori di organelli.
• Le applicazioni ELISA possono richiedere l'abbinamento con un anticorpo da cattura adatto; testare la linearità utilizzando standard di MMP13 ricombinante.
• Poiché MMP13 è una proteina secreta, i surnatanti di coltura cellulare o gli estratti di tessuto sono tipi di campione adatti.

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