Anticorpo monoclonale coniglio Anti-MMP2 per WB e ELISA - P08253

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MMP2

• MMP2, nota anche come collagenasi di tipo IV 72 kDa, gelatinasi A e CLG4A, è una metalloproteinasi della matrice espressa ubiquitariamente che svolge un ruolo fondamentale nella degradazione della matrice extracellulare e nel rimodellamento tissutale.
• Le sue funzioni principali includono il rimodellamento vascolare, la promozione dell'angiogenesi, l'agevolazione della riparazione tissutale, l'invasione e la metastasi tumorale, l'infiammazione e la rottura della placca aterosclerotica. Processa anche substrati non appartenenti alla matrice come la big endotelina-1 e il CGRP di tipo β, promuovendo la vasocostrizione, e taglia KISS su un legame Gly-Leu.
• Il dominio PEX C-terminale esercita attività anti-angiogeniche e antitumorali inibendo la migrazione cellulare e l'adesione a FGF2 e vitronectina, agendo come ligando per l'integrina αvβ3 sui vasi sanguigni.
• MMP2 media la proteolisi di CHUK/IKKA, innescando una risposta immunitaria innata primaria tramite la segnalazione da stress mitocondriale-nucleare e l'attivazione delle vie trascrizionali di NF-κB, NFAT e IRF.
• La localizzazione subcellulare prevede la secrezione nello spazio/matrice extracellulare, oltre alla presenza nella membrana, nel nucleo, nel citoplasma e nei mitocondri.
• MMP2 è prodotta dai fibroblasti normali della pelle, e il suo frammento PEX è espresso in vari tumori tra cui gliomi, cancro della mammella e cancro della prostata.
• Le caratteristiche strutturali chiave includono un peptide segnale, un propeptide (forma zimogena), un dominio catalitico con sito di legame dello zinco, un dominio di tipo II della fibronettina e un dominio C-terminale simile all'emopexina; subisce scissione autocatalitica e multiple modifiche per fosforilazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il dominio C-terminale simile all'emopexina (aa 451–660), che è unico per MMP2 tra i membri della famiglia MMP; si prevede che questa regione conferisca specificità per il target nelle applicazioni di western blotting e ELISA.
• Per il western blotting di MMP2, si consiglia di includere controlli positivi appropriati (ad es. lisati di tessuti/cellule di uomo, topo o ratto noti per esprimere MMP2, come fibroblasti o linee tumorali) e di utilizzare condizioni riducenti per rilevare la pro-forma di ~74 kDa e la forma attiva di ~64 kDa.
• In ELISA, abbinare questo anticorpo a un anticorpo di rilevamento adatto (ad es. un altro clone che riconosca un epitopo distinto) per i formati sandwich; si raccomanda la pre-validazione della coppia di anticorpi nella matrice di campione pertinente.
• Poiché MMP2 è secreta, si consiglia di preparare mezzi condizionati o supernatanti di coltura in terreno privo di siero per arricchire la proteina, in particolare quando si analizzano livelli endogeni in campioni a bassa abbondanza.

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