Anticorpo policlonale anti-MMP9 per WB, ELISA - P41245

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della MMP9

• La metalloproteinasi di matrice-9 (MMP9), nota anche come gelatinasi B o collagenasi di tipo IV da 92 kDa, è una endopeptidasi secretoria dipendente dallo zinco appartenente alla famiglia delle metalloproteinasi della matrice. Viene sintetizzata come zimogeno (pro-MMP9) che richiede un attivazione proteolitica per diventare completamente attiva.
• La MMP9 svolge un ruolo critico nella degradazione della matrice extracellulare (ECM), in particolare nella scissione del collagene di tipo IV e V in grandi frammenti C-terminali tre quarti e frammenti N-terminali più corti di un quarto, nonché della fibronectina, ma non degrada la laminina o il peptide Pz.
• È coinvolta nella migrazione dei leucociti attraverso le membrane basali facilitando la proteolisi della ECM, contribuendo così alle risposte infiammatorie e al traffico delle cellule immunitarie.
• La MMP9 partecipa al rimodellamento osseo mediando il riassorbimento osseo osteoclastico, un processo essenziale per lo sviluppo osseo normale e la perdita ossea patologica. Riferimenti correlati: PMID:8132709
• Taglia NINJ1 (proteina 1 indotta da lesione nervosa) per generare ninjurina-1 secretata, che può svolgere ruoli nell'adesione cellulare e nell'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:23142597, PMID:32883094
• La MMP9 si trova nello spazio extracellulare, prevalentemente associata alla matrice extracellulare, dove interagisce con altri componenti della ECM e inibitori come i TIMP (inibitori tissutali delle metalloproteinasi).
• L'enzima contiene domini strutturali caratteristici tra cui un peptide segnale, un pro-dominio che mantiene la latenza, un dominio catalitico con un motivo di legame allo zinco e un dominio simile all'emopecina coinvolto nel riconoscimento del substrato e nella localizzazione dell'enzima; richiede anche calcio per la stabilità strutturale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 108-730 della MMP9 murina, una regione che copre i domini catalitico ed emopecina, il che suggerisce che l'anticorpo potrebbe riconoscere sia la forma pro- che quella attiva. Per la WB, potrebbe essere osservata una banda a circa 80 kDa (forma pro) e possibili bande inferiori per le specie attive clivate. Validare nel sistema di campione pertinente.
• Questo anticorpo policlonale di coniglio è adatto per Western blot (WB) ed ELISA. Per la WB, considerare l'uso di condizioni riducenti e includere controlli appropriati. Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; ottimizzare le concentrazioni di rivestimento e rilevamento per il proprio saggio specifico.
• La reattività crociata è validata per la MMP9 murina. Quando si utilizzano tessuti o cellule di altre specie, verificare l'omologia di sequenza ed eseguire un esperimento pilota.
• Conservare l'anticorpo come raccomandato (la spedizione in borsa del ghiaccio indica la conservazione a freddo) ed evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento per mantenere l'attività.

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