Anticorpo monoclonale anti-CD140b/PDGFR beta di topo (PE) per citometria a flusso - P05622

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD140b/PDGFR beta

• PDGFRB (noto anche come CD140b, PDGFR-1) è una tirosin-chinasi recettoriale che lega i ligandi del fattore di crescita derivato dalle piastrine (PDGF), inclusi PDGFB, PDGFD e gli eterodimeri PDGFA/PDGFB, ed è fondamentale per lo sviluppo embrionale, la proliferazione cellulare, la sopravvivenza, la differenziazione, la chemiotassi e la migrazione.
• Il recettore svolge un ruolo critico nello sviluppo dei vasi sanguigni promuovendo la proliferazione, la migrazione e il reclutamento dei periciti e delle cellule muscolari lisce vascolari verso le cellule endoteliali; è essenziale per la normale formazione del sistema cardiovascolare e per la ramificazione dei capillari glomerulari nel rene.
• PDGFRB appartiene alla famiglia dei recettori del PDGF e può formare omodimeri o eterodimeri con PDGFRA, con esiti della segnalazione modulati dalla specificità del ligando e dalla composizione del dimero recettoriale.
• In seguito al legame con il ligando, PDGFRB attiva molteplici cascate di segnalazione a valle, incluse le vie PLCG1, PI3K-AKT e RAS-MAPK, determinando riarrangiamenti del citoscheletro, increspature della membrana e risposte trascrizionali.
• Il recettore è localizzato prevalentemente sulla membrana cellulare, ma dopo l'internalizzazione si localizza anche nelle vescicole citoplasmatiche e nel lume lisosomiale, contribuendo all'attenuazione del segnale.
• PDGFRB è soggetto a estese modificazioni post-traduzionali, tra cui l'autofosforilazione su molteplici residui di tirosina, la glicosilazione N-linked e l'ubiquitinazione; contiene domini simili alle immunoglobuline, un inserto chinasico e un dominio tirosin-chinasico suddiviso.
• Nei tessuti adulti, PDGFRB è debolmente espresso nelle cellule mesangiali glomerulari e nelle cellule interstiziali, ma la sua espressione è notevolmente aumentata nella fibrosi renale, suggerendo un ruolo nella progressione delle malattie fibrotiche.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Poiché l'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 32-530), è probabile che l'anticorpo riconosca il recettore nativo esposto sulla superficie, rendendolo adatto alla citometria a flusso su cellule vive non permeabilizzate.
• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tipo cellulare e le condizioni di colorazione specifici; considerare l'uso di appropriati controlli isotipici e il blocco dei recettori Fc per ridurre al minimo il legame aspecifico.
• L'anticorpo è validato per il topo; la reattività crociata con altre specie non è stata testata. Se utilizzato in altri sistemi modello, validarlo confrontando l'espressione nota di PDGFRB di topo.
• PDGFRB è una proteina di 123 kDa; assicurarsi di effettuare una compensazione adeguata quando si utilizzano anticorpi coniugati con PE in pannelli di citometria a flusso multicolore, poiché la PE è un fluoroforo brillante.
• Considerare l'uso di metodi enzimatici o non enzimatici di dissociazione cellulare che preservino gli epitopi di superficie, poiché la tripsinizzazione può scindere il recettore e ridurre l'intensità della colorazione.

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