Anticorpo monoclonale anti-CD272/BTLA di topo () per citometria a flusso - Q7TSA3

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD272/BTLA

• CD272 (BTLA) è un attenuatore dei linfociti B e T, un recettore inibitorio appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline. Contiene un dominio extracellulare di tipo immunoglobulinico, un'elica transmembrana e una coda citoplasmatica con motivi inibitori basati sulla tirosina degli immunorecettori (ITIM).
• BTLA regola negativamente la segnalazione del recettore dell'antigene nei linfociti reclutando le protein-tirosina fosfatasi SHP-1 e SHP-2. Riferimenti correlati: PMID:12796776 PMID:14652006
• Interagisce con TNFRSF14 (HVEM) in cis (sulla stessa cellula) o in trans (tra cellule). Le interazioni in cis mantengono uno stato di riposo nelle cellule T naive, mentre le interazioni in trans forniscono segnali di sopravvivenza alle cellule T effettrici durante le risposte immunitarie adattative. Riferimenti correlati: PMID:19915044
• È espresso nelle cellule T e B spleniche, nei tessuti dei linfonodi e anche nei macrofagi, nelle cellule NK e nelle cellule dendritiche. Si osserva una distribuzione tissutale polimorfica tra diversi ceppi di topo.
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare come proteina di membrana di tipo I a singolo passaggio, con un peptide segnale N-terminale scisso durante la maturazione.
• Le modifiche post-traduzionali includono glicosilazione e fosforilazione, e la sua struttura contiene ponti disolfuro importanti per la stabilità del dominio immunoglobulinico.
• Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme, sebbene il significato funzionale nel topo non sia ancora completamente caratterizzato.
• È ampiamente coinvolto nell'immunità adattativa e sono disponibili dati strutturali tridimensionali.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è direttamente coniugato ad , un fluorocromo rosso, ed è adatto al rilevamento mediante citometria a flusso. Si consiglia di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale per il proprio sistema sperimentale.
• Generato contro il dominio extracellulare (amminoacidi 30-176), probabilmente riconosce il recettore nativo sulla superficie cellulare. Includere controlli isotipici appropriati per garantire la specificità.
• Per la colorazione delle cellule immunitarie, combinarlo con marcatori di linea per delimitare popolazioni specifiche (ad es., cellule T, cellule B, cellule NK).
• Si possono applicare protocolli standard di colorazione per la citometria a flusso (ad es., 30 minuti a 4 °C), ma è necessario validare le fasi di fissazione poiché potrebbero influire sul riconoscimento dell'epitopo.
• Essendo un anticorpo monoclonale di coniglio, può essere rilevato con un reagente secondario anti-IgG di coniglio, se necessario, sebbene la coniugazione diretta elimini questo passaggio.

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