Anticorpo monoclonale anti-CD274/PD-L1 di topo () per citometria a flusso - Q9EP73

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD274/PD-L1

• CD274, noto anche come PD-L1 o B7-H1, è una proteina transmembrana di tipo I appartenente alla superfamiglia delle immunoglobuline.
• Agisce come ligando per il recettore inibitorio PDCD1/PD-1, svolgendo un ruolo fondamentale nel mantenimento della tolleranza immunitaria limitando le risposte effettrici delle cellule T. Riferimenti correlati: PMID:11238124
• Attraverso un recettore non ancora definito, può co-stimolare determinati sottogruppi di cellule T che producono prevalentemente interleuchina-10 (IL10). Riferimenti correlati: PMID:11015443 PMID:12719480
• I tumori sfruttano la via PD-1/PD-L1 per inibire la funzione dei linfociti T citotossici (CTL) e sfuggire alla distruzione immunitaria. Il blocco di questa interazione può invertire l'esaurimento delle cellule T e potenziare l'immunità antitumorale. Riferimenti correlati: PMID:12218188 PMID:27281199
• PD-L1 si localizza sulla membrana cellulare e attraversa anche gli endosomi precoci e di riciclo.
• È altamente espresso nel cuore, nel timo, nel muscolo scheletrico e nei polmoni, ed è espresso inducibilmente sulle cellule dendritiche attivate, sulle cellule B, sui macrofagi e su diverse linee cellulari tumorali.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione N-linked, la formazione di legami disolfuro e l'ubiquitinazione, che ne modulano la stabilità e la funzione.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per il tipo di cellule specifico e le condizioni sperimentali impiegate.
• Utilizzare controlli isotipici e controlli di compensazione appropriati quando si esegue il multiplexing con altri fluorofori.
• Valutare l'utilizzo di reagenti per il blocco dei recettori Fc al fine di ridurre al minimo il legame aspecifico nei campioni di topo.
• Poiché l'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare, si prevede che l'anticorpo riconosca la PD-L1 nativa di superficie; per rilevare l'espressione sulla superficie cellulare si raccomanda la colorazione di cellule vive.
• Sebbene sia validato per la citometria a flusso, se applicato ad altre tecniche, come il western blot, si noti che la glicosilazione può causare un peso molecolare apparente superiore ai 32 kDa previsti; sarebbe necessaria un'ulteriore validazione.

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