Anticorpo Monoclonale Anti-Mouse CD3 per Citometria a Flusso - P04235 / P22646

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD3

• La proteina bersaglio, CD3δ (glicoproteina di superficie delle cellule T catena delta CD3), è un componente fondamentale del complesso TCR-CD3 presente sulla superficie dei linfociti T, dove svolge un ruolo essenziale nelle risposte immunitarie adattative.
• Insieme a CD3ε, CD3γ e CD247/CD3ζ, CD3δ trasmette i segnali mediati dal TCR attraverso la membrana cellulare dopo il riconoscimento dell'antigene da parte del recettore delle cellule T (TCR), innescando vie di segnalazione a valle.
• Tutte le catene CD3 contengono motivi di attivazione basati sulla tirosina dei recettori immunitari (ITAM) nei loro domini citoplasmatici. Upon TCR engagement, questi ITAM vengono fosforilati dalle chinasi della famiglia Src LCK e FYN, portando all'attivazione di cascate di segnalazione.
• CD3δ svolge un ruolo critico nella differenziazione dei timociti assicurando il corretto assemblaggio intracellulare e l'espressione in superficie del complesso TCR-CD3; senza un complesso funzionale, i timociti non riescono a differenziarsi correttamente. Riferimenti correlati: PMID:10935641
• CD3δ interagisce con i corecettori CD4 e CD8, stabilendo un legame funzionale tra il TCR e queste molecole, che è richiesto per l'attivazione e la selezione positiva delle cellule T CD4+ o CD8+.
• La proteina CD3δ è una glicoproteina transmembrana con un peptide segnale, un'elica transmembrana singola e un dominio citoplasmatico contenente ITAM. È soggetta a fosforilazione e formazione di legami disolfuro.
• CD3ε, il secondo bersaglio riconosciuto da questo anticorpo, condivide somiglianze strutturali e funzionali con CD3δ e fa anch'esso parte del complesso TCR-CD3, contribuendo alla trasduzione del segnale e allo sviluppo delle cellule T.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico derivato dal CD3 di topo, suggerendo che l'anticorpo probabilmente riconosce un epitopo lineare conservato tra le catene δ ed ε, coerente con la sua doppia reattività.
• Per la citometria a flusso (FC), considerare di titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale per la specifica popolazione di linfociti di topo. Validare la colorazione sia in campioni di cellule T a riposo che attivate.
• Dato che questo è un anticorpo monoclonale di ratto, assicurarsi di utilizzare appropriati reagenti di rilevamento secondari anti-ratto o strategie di coniugazione diretta se si eseguono multiplex con altri anticorpi.
• A causa dei pesi molecolari previsti (19 kDa per CD3δ, 21 kDa per CD3ε), l'anticorpo potrebbe essere adatto anche per il Western blot in condizioni denaturanti, sebbene i dati del produttore supportino l'uso in FC. Considerare una validazione interna se si esplorano applicazioni aggiuntive.

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