Anticorpo monoclonale anti-CD34 di topo per citometria a flusso - Q64314

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CD34

• CD34 è una proteina di membrana di tipo I a passaggio singolo e membro della famiglia delle sialomucine, codificata dal gene Cd34 nel topo. Lo splicing alternativo genera molteplici isoforme.
• Agisce come possibile molecola di adesione nell'emopoiesi precoce, mediando l'adesione delle cellule staminali alla matrice extracellulare del midollo osseo o alle cellule stromali. Può fungere da impalcatura per glicani specifici della linea cellulare, presentando ligandi carboidratici alle selectine (per similarità).
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente a livello della membrana cellulare, coerentemente con il suo ruolo di recettore transmembrana.
• Espressione tissutale: rilevata nel rene, in particolare nel segmento sottile dell'ansa di Henle (a livello proteico). Altamente espressa nelle linee cellulari progenitrici ematopoietiche, nel cervello e nei testicoli; moderatamente nel timo, nella milza e nel midollo osseo; assente nel fegato adulto. Riferimenti correlati: PMID:31605441 PMID:1709048
• Classificata come glicoproteina e fosfoproteina, con un peptide segnale e un'unica elica transmembrana.
• È noto che partecipa all'adesione cellulare e alla trasduzione del segnale, influenzando le decisioni relative al destino delle cellule staminali.
• La proteina è fortemente glicosilata, contribuendo al suo peso molecolare osservato di circa 41 kDa.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (aa 35–287), massimizzando l'accessibilità per la citometria a flusso su cellule vive. Non è necessaria alcuna permeabilizzazione.
• Ottimizzare la colorazione titolando l'anticorpo in un intervallo di concentrazione (ad es. 0,1–5 μg/mL) nel proprio sistema sperimentale specifico e includere controlli isotipici appropriati.
• Poiché l'anticorpo è direttamente coniugato con , non è necessario alcun anticorpo secondario, riducendo il fondo e le fasi di preparazione.
• Per la FC quantitativa, valutare l'utilizzo di microsfere di calibrazione per convertire l'intensità di fluorescenza in molecole di fluorocromo solubile equivalente (MESF).
• La densità dell'antigene può variare tra i diversi tipi cellulari; validare l'anticorpo su popolazioni note positive (ad es. cellule progenitrici ematopoietiche) e negative.

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