Anticorpo Monoclonale Anti-Mouse CD45 () per IF/ICC, FC - P06800

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del CD45

• Il CD45, noto anche come antigene comune dei leucociti (L-CA), Ly-5 e T200, è una fosfatasi proteica tirosinica di tipo recettoriale C codificata dal gene Ptprc nel topo.
• È essenziale per l'attivazione delle cellule T; a seguito dell'ingaggio del recettore degli antigeni, il CD45 regola positivamente la co-attivazione tramite il legame con DPP4.
• La proteina contiene due domini fosfatasi intracellulari in tandem; il primo dominio è cataliticamente attivo, mentre il secondo modula la specificità del substrato (Per somiglianza).
• Il CD45 defosforila molecole di segnalazione chiave tra cui SKAP1, FYN e LYN, modulando così l'attività di LYN e la segnalazione a valle del TCR.
• Alla sinapsi immunologica, il CD45 si localizza nei raft di membrana e interagisce con CLEC10A sulle cellule dendritiche, regolando con precisione le soglie di attivazione delle cellule T per prevenire l'autoimmunità.
• Esistono multiple isoforme di CD45 dovute allo splicing alternativo, con pesi molecolari compresi tra 130 e 144 kDa; la proteina è pesantemente glicosilata e fosforilata.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• Per immunofluorescenza (IF/ICC): Le condizioni di fissazione e permeabilizzazione possono influenzare l'accessibilità dell'epitopo; considerare il test di protocolli di fissazione con metanolo rispetto a paraformaldeide.
• L'immunogeno copre una grande porzione del dominio extracellulare (aa 26–566), suggerendo un potenziale riconoscimento di multiple isoforme di CD45; validare la specificità dell'isoforma nel proprio contesto sperimentale se necessario.
• Per citometria a flusso (FC): Eseguire una titolazione dell'anticorpo per determinare la concentrazione ottimale di colorazione e includere sempre i controlli di isotipo appropriati.
• Il CD45 è ampiamente espresso su tutti i leucociti; pertanto, ci si aspetta una colorazione diffusa nei tessuti linfoidei; utilizzare marcatori specifici di lineaia per un gating preciso delle popolazioni cellulari.

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