Anticorpo Monoclonale Anti-Topo CD8a () per Citometria a Flusso - P01731

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CD8a

• CD8a, noto anche come Lyt-2, è una glicoproteina di superficie delle cellule T e un membro della superfamiglia delle immunoglobuline.
• Funziona come co-recettore per le molecole MHC di classe I, interagendo contemporaneamente con il recettore delle cellule T (TCR) e l'MHC di classe I sulle cellule presentanti l'antigene.
• In seguito al riconoscimento dell'antigene, CD8a recluta la chinasi Src LCK nel complesso TCR-CD3, avviando la segnalazione intracellulare per l'attivazione dei linfociti T, la produzione di citochine e le risposte citotossiche.
• Nei linfociti T citotossici (CTL), questo meccanismo consente il riconoscimento e l'eliminazione di cellule infette o tumorali.
• Nelle cellule NK, gli omodimeri di CD8A promuovono la sopravvivenza e l'uccisione seriale delle cellule bersaglio e supportano la differenziazione in cellule T CD8 di memoria.
• La proteina è localizzata sulla membrana cellulare con un singolo dominio transmembrana e contiene un dominio extracellulare di tipo immunoglobulina.
• Le principali modificazioni post-traduzionali includono glicosilazione, formazione di ponti disolfuro e palmitoilazione, importanti per la sua stabilità e funzione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde al dominio extracellulare (amminoacidi 28-196), che si sovrappone alla regione di legame per l'MHC di classe I; pertanto, è probabile che l'anticorpo riconosca la proteina di superficie nativa. Si consiglia di validare il legame su cellule vive tramite FC.
• Per la citometria a flusso, la concentrazione ottimale dell'anticorpo dovrebbe essere titolata su linfociti di topo (ad es. splenociti o timociti) come controllo positivo. Utilizzare un appropriato controllo isotipo.
• Poiché CD8a è una proteina transmembrana, i passaggi di fissazione e permeabilizzazione generalmente non sono necessari per la colorazione di superficie, ma è importante mantenere le cellule vitali durante la preparazione.
• Se si utilizza in combinazione con altri anticorpi coniugati a fluorofori, verificare la possibile sovrapposizione spettrale con (simile al FITC).

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