Anticorpo monoclonale anti-F4/80 di topo prodotto nel ratto (biotina) per citometria a flusso - Q61549

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di F4/80

• F4/80 (Adgre1, Emr1) è il recettore E1 accoppiato a proteina G di adesione del topo, una glicoproteina di superficie cellulare e membro della famiglia EGF-TM7 dei GPCR di classe B.
• È un recettore orfano coinvolto nell'adesione cellulare e nelle interazioni cellula-cellula, in particolare all'interno del sistema immunitario; può inoltre svolgere un ruolo nello sviluppo delle cellule T regolatorie (Treg).
• Nei topi, F4/80 è espresso sui macrofagi, ma è assente da quelli localizzati nelle aree delle cellule T dei linfonodi e della milza; mostra un'espressione di basso livello sui monociti del sangue, rendendolo un marcatore pan-macrofagico consolidato.
• La proteina è un recettore transmembrana multipasso localizzato sulla membrana cellulare.
• Strutturalmente, contiene domini simili all'EGF e un dominio GAIN (induttore dell'autoproteolisi dei GPCR); si prevede che contenga più ponti disolfuro e siti di glicosilazione.
• Le parole chiave assegnate da UniProtKB includono: immunità adattativa, segnalazione del calcio (tipica dei GPCR), membrana cellulare, glicoproteina e attività recettoriale.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per la citometria a flusso, ottimizzare la concentrazione dell'anticorpo mediante titolazione utilizzando la popolazione cellulare bersaglio; le diluizioni iniziali tipiche per i coniugati con biotina variano ampiamente e devono essere determinate sperimentalmente.
• L'etichetta biotina consente un rilevamento flessibile con coniugati streptavidina-fluoroforo; assicurarsi che il reagente di rilevamento sia compatibile con il pannello e la configurazione laser utilizzati.
• Quando si colorano i macrofagi di topo, pre-incubare con un blocco dei recettori Fc (ad es., anti-CD16/CD32) per ridurre il legame aspecifico.
• F4/80 è una grande proteina transmembrana; se si fissano e permeabilizzano le cellule, verificare che il protocollo preservi il riconoscimento dell'epitopo di superficie.
• Poiché l'espressione di F4/80 è assente nei macrofagi delle aree delle cellule T dei tessuti linfoidi, includere controlli positivi appropriati (ad es., macrofagi della polpa rossa splenica) e controlli negativi (ad es., zona delle cellule T dei linfonodi).

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