Anticorpo monoclonale anti-IgM di topo per WB, IHC-P, FC, ELISA - P01872

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Regione Costante Pesante dell'IgM

• Identità Proteica e Isoforme: Il target è la catena pesante costante mu dell'immunoglobulina (catena mu Ig), codificata dal gene Ighm (alias Igh-6). Costituisce la regione costante degli anticorpi IgM ed esiste sia in forma secreta (sIgM) che legata alla membrana (mIgM) tramite splicing alternativo.
• Legame Antigenico e Assemblaggio del Dominio Variabile: Nell'immunità umorale, i domini variabili di una catena pesante e di una catena leggera formano il sito di legame per l'antigene. Questi domini sono assemblati mediante riarrangiamento V-(D)-J e subiscono ipermutazione somatica per la maturazione dell'affinità dopo esposizione all'antigene (Per similarità).
• Multimerizzazione e Polireattività dell'IgM Secreto: La sIgM si multimerizza in pentameri o esameri per un legame antigenico ad alta avidità. La sIgM naturale è polireattiva, riconoscendo strutture conservate self e derivate da patogeni, mentre la sIgM immune è antigene-specifica; entrambe sono essenziali per una risposta umorale efficiente. Riferimenti correlati: PMID:10899913 PMID:28135254 PMID:34788614
• Funzioni Effettrici tramite Recettori Fc e Complemento: Le funzioni effettrici della sIgM sono mediate dall'alta affinità del recettore Fc FCMR sulle cellule linfoidi, promuovendo le risposte delle IgG e la tolleranza al self, e reclutando C1q per attivare la via classica del complemento, facilitando la neutralizzazione dei patogeni e la fagocitosi delle cellule apoptotiche. Riferimenti correlati: PMID:10899913 PMID:11062505 PMID:28135254
• Immunità Mucosa e Transcitosi: Nelle superfici mucose, la sIgM viene trasportata attraverso l'epitelio da PIGR e secreta con il componente secretorio. I complessi IgM-antigene possono essere retro-transcitati tramite FCMR attraverso le cellule M verso i tessuti linfoidi. Riferimenti correlati: PMID:34788614
• Segnalazione del BCR IgM Legato alla Membrana: Come parte del complesso del recettore delle cellule B, l'IgM legato alla membrana fornisce una segnalazione tonica costitutiva necessaria per la sopravvivenza dei linfociti B e media la segnalazione del pre-BCR che regola il riarrangiamento dei geni delle immunoglobuline e l'esclusione allelica.
• Localizzazione Subcellulare ed Espressione Tissutale: La proteina è localizzata sulla membrana cellulare (come componente del BCR) ed è secreta. È espressa a livello proteico nel midollo osseo e nelle cellule B-1 e B-2.
• Modifiche Post-Traduzionali e Parole Chiave Strutturali: Caratterizzata da ponti disolfuro, glicosilazione N-legata, domini immunoglobulinici e un'elica transmembrana (nell'isoforma legata alla membrana). Parole chiave: ponte disolfuro, glicoproteina, dominio immunoglobulinico, membrana, secreto, transmembrana.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato è una proteina di fusione ricombinante che comprende gli amminoacidi 105-454 di Ighm di topo (P01872), corrispondente a una regione all'interno del dominio costante. Questo design può mirare a epitopi conservati tra le isoforme secreta e legata alla membrana, potenzialmente consentendo il rilevamento di entrambe le forme.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto del target è di circa 50–53 kDa in condizioni riducenti. Si consiglia di utilizzare controlli appropriati, come lisati di milza di topo o IgM purificata, e validare il pattern delle bande nel proprio sistema campione.
• Nell'immunoistochimica su tessuti inclusi in paraffina (IHC-P), il recupero dell'antigene ottimale e la diluizione dell'anticorpo dovrebbero essere determinati sperimentalmente. L'anticorpo è destinato all'uso su tessuti di topo; non è stata riportata reattività crociata con altre specie.
• Per la citometria a flusso (FC), assicurarsi un blocco adeguato dei recettori Fc e utilizzare reagenti di rilevamento direttamente coniugati o secondari compatibili con il formato monoclonale di coniglio. Si raccomanda una pre-validazione della colorazione nelle popolazioni di linfociti B di topo (ad es., splenociti).
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o il rilevamento dell'IgM di topo. Considerare l'abbinamento con un appropriato anticorpo di rilevamento per configurazioni ELISA sandwich e validare la sensibilità e la specificità del saggio.

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