Anticorpo Monoclonale Anti-Mouse IL-12 p40 () per Citometria a Flusso Intracellulare - P43432

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di IL-12 p40

• IL-12 p40 è una subunità dell'interleuchina-12 (IL-12) e dell'interleuchina-23 (IL-23), citochine centrali nella regolazione immunitaria.
• Nell'IL-12, si associa alla p35 per formare l'IL-12p70 biologicamente attivo, che promuove la differenziazione Th1 e la produzione di IFN-γ.
• Come componente dell'IL-23, la p40 si associa alla p19 (IL23A) per guidare le risposte Th17 e il rilascio di citochine pro-infiammatorie.
• IL-12 p40 agisce come fattore di crescita per le cellule T e NK attivate, migliorando la loro attività litica e stimolando la secrezione di IFN-γ da parte dei PBMC a riposo.
• La sua segnalazione attraverso il recettore IL-12 attiva la via Jak-Stat, collegando l'immunità innata e adattativa.
• È una glicoproteina secreta con un peptide segnale, un dominio simile alle immunoglobuline e legami disolfuro, riflettendo la sua struttura di citochina.
• Il gene Il12b del mouse (Gene ID: 16160) codifica un precursore di 335 amminoacidi, con un peso della proteina matura di circa 38 kDa.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 23–335 di IL-12 p40 di topo, coprendo la maggior parte del dominio extracellulare; l'anticorpo può rilevare sia la subunità libera che la p40 all'interno degli eterodimeri IL-12/IL-23.
• Per la citometria a flusso intracellulare, ottimizzare le condizioni di permeabilizzazione e titolare l'anticorpo per determinare la concentrazione di colorazione ottimale.
• Includere i controlli di isotipo appropriati e utilizzare cellule immunitarie di topo attivate (es. macrofagi o cellule dendritiche stimolate con LPS/IFN-γ) come controlli positivi.
• Poiché IL-12 p40 è secreta, potrebbe essere richiesto un inibitore del trasporto proteico (es. brefeldina A) per trattenere la citochina intracellulare prima della colorazione.

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