Anticorpo policlonale anti-MRE11 per WB, IP, ELISA - P49959

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di MRE11

• MRE11 è un componente centrale del complesso MRN, essenziale per la riparazione delle rotture a doppio filamento, la ricombinazione del DNA, il mantenimento dei telomeri e la meiosi. Riferimenti correlati: PMID:11741547, PMID:14657032, PMID:22078559
• Il complesso MRN facilita la riparazione mediante ricombinazione omologa mediando la resezione delle estremità del DNA. MRE11 taglia inizialmente il filamento 5' per prevenire la NHEJ, quindi genera DNA a singolo filamento 3' mediante attività esonucleasica, consentendo la resezione a lungo raggio da parte di EXO1 e DNA2. Riferimenti correlati: PMID:24316220, PMID:28867292
• MRE11 possiede attività sia di endonucleasi per il DNA a singolo filamento sia di esonucleasi 3'-5' specifica per il DNA a doppio filamento. La sua attività endonucleasica è specificamente promossa da RBBP8/CtIP per rimuovere gli addotti proteina-DNA e generare estremità pulite delle rotture a doppio filamento. Riferimenti correlati: PMID:11741547, PMID:22078559, PMID:24316220, PMID:27814491, PMID:27889449, PMID:30787182
• Il complesso MRN è necessario per la segnalazione del danno al DNA attraverso l'attivazione delle chinasi ATM e ATR, un ruolo indipendente dall'attività nucleasica di MRE11. Riferimenti correlati: PMID:14657032, PMID:15064416, PMID:15790808
• Nei telomeri, il complesso MRN può modulare la formazione dei t-loop, contribuendo all'integrità telomerica. Riferimenti correlati: PMID:10888888
• Il complesso MRN è inoltre coinvolto nell'elaborazione degli R-loop e nell'attivazione della via immunitaria innata cGAS-STING durante la tumorigenesi. Riferimenti correlati: PMID:31537797
• MRE11 contiene due domini di legame al DNA, che consentono il legame sia al DNA a singolo filamento sia al DNA a doppio filamento.
• MRE11 è soggetto a molteplici modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione, metilazione, fosforilazione e ubiquitinazione; le mutazioni sono associate a varianti patologiche e ciliopatie.
• MRE11 si localizza nel nucleo, nei cromosomi e nei telomeri.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 290-485 di MRE11 umano, una regione centrale. Si prevede che questo anticorpo policlonale rilevi MRE11 a lunghezza intera (81 kDa) nel western blot denaturante (WB). Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario (ad es. 1:500-1:2000) per il proprio sistema sperimentale.
• Per l'immunoprecipitazione (IP), considerare l'utilizzo di almeno 2-5 µg di anticorpo per 500 µg di lisato cellulare. Includere controlli positivi e negativi appropriati e, se necessario, validare la banda bersaglio mediante spettrometria di massa o silenziamento tramite siRNA.
• Nelle applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo contro l'immunogeno o la proteina purificata per determinare la concentrazione di lavoro ottimale. Confermare la specificità testandolo contro antigeni non correlati.
• Poiché è stata riportata reattività crociata per uomo e ratto, validare l'anticorpo nella specie e nel tessuto di interesse utilizzando controlli positivi noti per esprimere MRE11.

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