Anticorpo Policlonale Anti-MSH2 per WB, IF/ICC, ELISA - P43246

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Background Biologico: Funzione e Localizzazione della Proteina Msh2 per la riparazione dei mismatch del DNA

• Componente chiave del sistema di riparazione dei mismatch del DNA post-replicativo (MMR). Forma due eterodimeri: MutS alfa (con MSH6) e MutS beta (con MSH3), che legano il DNA non corrispondente per avviare la riparazione.
• MutS alfa riconosce mismatch di singole basi e piccoli loop di inserzione-cancellazione (1–2 nucleotidi), mentre MutS beta riconosce loop più grandi fino a 13 nucleotidi.
• Dopo il legame, gli eterodimeri piegano il DNA, proteggono circa 20 paia di basi e reclutano MutL alfa per coordinare la discriminazione del filamento, l'escissione e la resintesi.
• Recluta l'elicasi del DNA MCM9 sulla cromatina, facilitando l'apertura del filamento contenente il mismatch. Riferimenti correlati: PMID:26300262
• Il legame e l'idrolisi dell'ATP agiscono come interruttore molecolare: il DNA non corrispondente innesca lo scambio ADP→ATP, convertendo MutS alfa in un morsetto scorrevole che diffonde lungo il DNA e permette le successive fasi di riparazione.
• Svolge anche un ruolo nella riparazione per ricombinazione omologa del DNA e, nei melanociti, può modulare la regolazione del ciclo cellulare e l'apoptosi indotta da UV-B.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente nucleare e associata ai cromosomi, coerente con la sua funzione di sorveglianza genomica. È espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione. Agisce come soppressore tumorale; le mutazioni sono associate al cancro del colon-retto ereditario non poliposico (HNPCC/sindrome di Lynch).

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 1–300 N-terminali di MSH2 umano. Essendo un anticorpo policlonale, riconosce più epitopi all'interno di questa regione, il che può fornire una rilevazione robusta, ma è necessario verificare la coerenza tra lotti diversi.
• Il peso molecolare previsto è di 105 kDa. Controlli positivi adatti includono le linee cellulari umane comunemente utilizzate (es. HeLa, HEK293) e tessuti di topo/ratto, data l'espressione ubiquitaria di MSH2.
• Per Western blot (WB) è possibile utilizzare protocolli standard; si consiglia di ottimizzare il bloccaggio e la diluizione dell'anticorpo per il tipo di campione specifico.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), è prevista una colorazione nucleare. Utilizzare metodi appropriati di fissazione e permeabilizzazione per preservare gli antigeni nucleari.
• La reattività crociata con topo e ratto permette studi traslazionali, ma si raccomanda la validazione nel sistema di campione specifico.

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