Anticorpo Monoclonale Anti-MSH6 per WB, IF/ICC, ELISA - P52701

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione dell'MSH6

• MSH6 codifica per la proteina di riparazione del mismatch del DNA Msh6, nota anche come GTBP, GTMBP, omologo della proteina MutS 6 e p160, un componente chiave del sistema di riparazione del mismatch post-replicativo (MMR).
• Si eterodimerizza con MSH2 per formare il complesso MutS alfa, che riconosce i mismatch a singola base e piccoli loop di inserzione-delezione, avviando la riparazione del DNA.
• MutS alfa si lega al DNA con mismatch, curva l'elica, protegge circa 20 paia di basi e recluta MutL alfa per dirigere gli eventi di riparazione a valle, inclusi la discriminazione del filamento, l'escissione e la risintesi.
• Il legame e l'idrolisi dell'ATP da parte di MSH6 agiscono come un interruttore molecolare: il DNA con mismatch innesca lo scambio ADP→ATP, inducendo un cambiamento conformazionale che converte MutS alfa in una pinza di scorrimento per la diffusione lungo il DNA.
• Il dominio PWWP di MSH6 si lega specificamente alla lisina 36 trimetilata dell'istone H3 (H3K36me3), mediando il suo reclutamento alla cromatina in fase G1 e all'inizio della fase S per collegare la replicazione del DNA con il riconoscimento del mismatch.
• Localizzato nel nucleo e sui cromosomi, MSH6 è fondamentale per mantenere la stabilità genomica; la sua disfunzione è associata alla sindrome di Lynch (cancro colorettale ereditario non poliposico) e altre neoplasie maligne.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 153 kDa, coerente con la sua grande massa prevista di 152 786 Da, e subisce modificazioni post-traduzionali inclusa l'acetilazione e la fosforilazione.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1–100) dell'MSH6 umano, che contiene il dominio PWWP; considerare che l'epitopo potrebbe essere mascherato dalle interazioni H3K36me3 nella cromatina fissata.
• Per il Western blot, è prevista una banda intorno ai 153 kDa; a causa delle grandi dimensioni, utilizzare gel SDS-PAGE a bassa percentuale e tempi di trasferimento prolungati.
• In IF/ICC, ci si aspetta una colorazione nucleare; la co-localizzazione con marcatori della cromatina potrebbe richiedere l'ottimizzazione della permeabilizzazione.
• Confermare la reattività incrociata con campioni di topo e ratto (validato su umano, topo, ratto), ma verificare l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno per altre specie prima dell'uso.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione adatto; considerare il rivestimento diretto con peptide sintetico o MSH6 ricombinante.

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