Anticorpo policlonale coniglio anti-MSRA per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9UJ68

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della MSRA

• MSRA (Peptide mitocondriale metionina solfossido reduttasi), nota anche come PMSR, è un enzima di riparazione che catalizza la riduzione reversibile dei residui di metionina solfossido nelle proteine riportandoli a metionina, ripristinando la funzione proteica danneggiata dallo stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:10452521, PMID:12039877
• Svolge un ruolo cruciale nel mantenimento della trasparenza del cristallino riparando la metionina ossidata nell'alfa-crystallin (CRYAA/CRYAB) e nel citocromo c (CYCS) (Per somiglianza).
• L'enzima è ampiamente espresso, con livelli più alti nel rene e nel cervelletto adulti, e moderati nel fegato, nei ventricoli cardiaci, nel midollo osseo e nell'ippocampo.
• La MSRA si localizza in più compartimenti subcellulari inclusi la matrice mitocondriale, il citoplasma, il nucleo e la membrana, in linea con il suo ruolo nella riparazione delle proteiche tra gli organelli.
• La proteina subisce splicing alternativo, uso alternativo del promotore e inizio della traduzione alternativo, generando multiple isoforme con N-termini distinti e segnali di targeting.
• La MSRA contiene un centro cisteina redox-attivo e forma un legame disolfuro transitorio durante la catalisi. È acetilata e miristilata, modifiche che possono regolare la sua attività o localizzazione.
• Parole chiave da UniProt: Acetilazione, Inizio alternativo, Uso alternativo del promotore, Splicing alternativo, Citoplasma, Legame disolfuro, Lipoproteina, Membrana, Mitocondrio, Miristato, Nucleo, Ossidoreduttasi, Centro redox-attivo, Peptide di transito.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato era una proteina di fusione ricombinante che copre gli amminoacidi 24-235 della MSRA umana (NP_036463.1), coprendo il dominio catalitico maturo della proteina. Considerare questa regione per la validazione della specificità dell'anticorpo.
• Per il Western blot (WB), il peso molecolare previsto è 26 kDa. Poiché la MSRA ha isoforme alternative e si localizza in più compartimenti, validare la specificità della banda utilizzando controlli pertinenti di knockout o knockdown.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), le condizioni di pre-fissazione/permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per la presenza del bersaglio nelle frazioni di membrana, mitocondriali e nucleari. Utilizzare marcatori di organelli appropriati per confermare la distribuzione subcellulare.
• L'ELISA può essere utilizzato per il rilevamento quantitativo; assicurarsi che l'antigene di rivestimento corrisponda alla sequenza dell'immunogeno per una sensibilità ottimale.
• La reattività crociata è validata per umano, topo e ratto; per altre specie, verificare l'omologia di sequenza prima dell'uso.

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