Anticorpo policlonale anti-MT-ATP6 per WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P00846

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di MT-ATP6

• MT-ATP6 codifica per la subunità a del complesso ATP sintasi F(0), nota anche come proteina F-ATPasi 6, un componente centrale del complesso V della catena respiratoria mitocondriale.
• La subunità a collabora con la subunità c (ATP5MC1) per formare il canale di conduzione protonica nel dominio F(0), guidando la sintesi di ATP tramite il meccanismo catalitico rotativo.
• La proteina risiede nella membrana mitocondriale interna e la attraversa più volte, creando due mezzi canali per la traslocazione protonica tramite un meccanismo di Grotthuss.
  Riferimenti correlati: PMID:37244256
• Le mutazioni in MT-ATP6 sono collegate a disturbi mitocondriali, tra cui la neuropatia ottica ereditaria di Leber, la sindrome di Leigh, neuropatia, atassia e retinite pigmentosa (come indicato nelle parole chiave delle malattie di UniProt).
• La proteina è altamente conservata tra uomo, topo e ratto, suggerendo un potenziale di reattività crociata.
• Con un peso molecolare di circa 25 kDa (24817 Da per calcolo), migra come una banda distinta in SDS–PAGE in condizioni appropriate.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno ha come target la sequenza aminoacidica N-terminale 1-100 di MT-ATP6 umano, che si prevede sia rivolta verso la matrice mitocondriale. Pertanto, la permeabilizzazione della membrana è essenziale per l'accesso all'epitopo in IF/ICC e IHC-P.
• Per il Western blotting, è prevista una banda vicino a 25 kDa. L'arricchimento delle frazioni mitocondriali può migliorare il rapporto segnale-rumore.
• Nell'immunocolorazione, è consigliabile la co-localizzazione con un marcatore mitocondriale (es. MitoTracker, anti-ATP5A) per confermare la specificità.
• I metodi di recupero dell'antigene (indotti dal calore o enzimatici) possono essere necessari per sezioni incluse in paraffina e fissate in formalina in IHC-P; testare su tessuti con abbondanti mitocondri (cuore, muscolo scheletrico).
• Queste raccomandazioni si basano sulle proprietà dell'immunogeno e sulla biologia del target; ogni laboratorio dovrebbe stabilire il proprio protocollo ottimizzato.

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