Anti-MT-CO3 Rabbit pAb per WB, IHC-P, ELISA - P00414

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di MT-CO3

• MT-CO3 (noto anche come COX3, COIII, COXIII) codifica per la subunità 3 della citocromo c ossidasi, un componente centrale dell'enzima terminale (complesso IV) della catena respiratoria mitocondriale.
• Localizzata nella membrana mitocondriale interna, MT-CO3 è una proteina transmembrana multi-pass che partecipa al trasferimento di elettroni e al pompaggio di protoni, essenziale per stabilire il gradiente protonico che guida la sintesi di ATP.
• La citocromo c ossidasi catalizza la riduzione dell'ossigeno molecolare ad acqua utilizzando elettroni dalla citocromo c, un passaggio critico nella respirazione aerobica.
• La proteina è espressa prevalentemente in tessuti con elevata attività metabolica, in linea con il suo ruolo nella fosforilazione ossidativa.
• Varianti patogene in MT-CO3 sono associate alla neuropatia ottica ereditaria di Leber (LHON) e ad altre malattie mitocondriali primarie, evidenziandone il significato clinico.
• La proteina matura ha un peso molecolare approssimativo di 30 kDa ed è sintetizzata all'interno dei mitocondri a partire dal genoma mitocondriale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno peptidico sintetico (amminoacidi 1-100) suggerisce che l'anticorpo possa rilevare MT-CO3 sia nativo che denaturato; considerare condizioni denaturanti standard per il WB e fissazione/permeabilizzazione ottimizzata per IHC-P.
• In Western blotting ci si aspetta una banda proteica a circa 30 kDa; convalidare i marcatori di peso molecolare e i controlli di caricamento nella propria matrice di campione specifica.
• È indicata una reattività crociata con topo e ratto; verificare l'allineamento della sequenza della regione immunogenica per assicurare la conservazione dell'epitopo, poiché lievi variazioni specie-specifiche potrebbero influenzare il legame.
• Per l'immunoistochimica, testare i metodi di recupero dell'antigene (es. buffer citrato, pH 6.0) e le diluizioni dell'anticorpo, poiché i target mitocondriali possono essere difficili da rilevare a causa dell'incorporazione nella membrana.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare il peptide immunizzante o MT-CO3 ricombinante come controllo positivo per valutare la specificità e il titolo dell'anticorpo.
• Le prestazioni degli anticorpi policlonali possono variare tra i lotti di produzione; raccomandiamo esperimenti pilota quando si passa a un nuovo lotto, includendo appropriati controlli positivi e negativi.

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